Transformation vs Transfection
Transformation och transfektion är två enkla tekniker som används för att introducera en främmande gen i en värdcell. Dessa tekniker beror dock på typen av värd- eller vektorsystem.
Vad är celltransformation?
Transformation är den teknik som används för att introducera gener i jäst- och bakterieceller. Denna teknik orsakar vanligtvis ärftliga förändringar i gener, och därmed är uttrycket av genen permanent. Bakterietransformationen introducerades först 1928 av Frederick Griffith. Sedan i början av 1970-talet användes denna teknik i E.coli. Under processen för transformation av E. coli, blötläggs cellerna i iskall lösning av CaCl2 Detta steg gör E.coli-celler kompetenta. Därefter blandas de kompetenta cellerna med plasmid-DNA och inkuberas på is i 20-30 minuter. Därefter ges en kort värmechock för att möjliggöra överföring av DNA in i cellen. Slutligen placeras cellerna i en näringsbuljong och inkuberas vid 37 ° C i 60-90 minuter för att etablera plasmiderna. När dessa steg är framgångsrika kan de transformerade cellerna placeras på ett lämpligt medium för förökning av celler. Eftersom transformation betraktas som en ineffektiv teknik, får den inte användas för beredning av klonbanker.
Vad är celltransfektion?
Transfektion är en metod för att introducera en främmande gen, vanligtvis, i däggdjursceller. Det finns två metoder för transfektion; nämligen transient transfektion och stabil transfektion. Vid övergående transfektion är genuttryck tillgänglig under en begränsad tid; sålunda orsakar förändringen av genen tillfälligt uttryck. Denna transfektionsmetod är enkel och snabb; därför kan den användas rutinmässigt. En nackdel med transient transfektion är svårigheten att ansöka om storskaliga proteinsyntessystem.
Under stabil transfektion integreras en målgen i värdcellens genom, och således är genuttrycket permanent, till skillnad från den transienta transfektionen.
Vad är skillnaden mellan transformation och transfektion?
• Transformation är införandet av en gen i en prokaryot cell (bakterier och jäst), medan transfektion brukar kallas införandet av en gen i en däggdjurscell.
• Transformation resulterar i ärftlig förändring i gener, medan transfektion kan resultera i antingen tillfälligt uttryck eller permanenta förändringar i gener.
