nyckelskillnad – HPLC vs LCMS
Låt oss först titta på innebörden av HPLC och LCMS innan vi analyserar skillnaden mellan HPLC och LCMS. Kromatografi är en separationsteknik inom kemisk analys där provbeståndsdelar separeras under passage genom ett kromatografiskt medium. Det involverar också interaktion med provet, den stationära fasen och den mobila fasen. HPLC står för High Performance Liquid Chromatography och används som en vätskekromatografimetod inom analytisk kemi. Kombinationen av vätskekromatografi och masspektroskopi (LCMS) har utvecklats för kvantitativ analys av utvalda biomolekyler och det är en mycket känslig, exakt och specifik analysprocedur jämfört med HPLC. Detta är nyckelskillnaden mellan HPLC och LCMC. Den här artikeln introducerar dig för HPLC och LCMC som handlar om kemisk analys och diskuterar skillnaderna mellan HPLC och LCMS.
Vad är HPLC?
Högpresterande vätskekromatografi (HPLC) är en populär separationsteknik inom analytisk kemi. Det används främst för att separera komponenterna, för att identifiera och kvantifiera varje komponent i en blandning. Tidigare var denna metod känd som högtrycksvätskekromatografi eftersom den var beroende av pumpar för att strömma ett trycksatt flytande lösningsmedel innefattande provblandningen genom en kolonn packad med ett fast adsorbentmaterial. Varje beståndsdel i provblandningen interagerar olika med det fasta adsorbentmaterialet, vilket resulterar i olika flödeshastigheter för olika beståndsdelar. Detta kan leda till att beståndsdelarna separeras när de rinner ut från HPLC-kolonnen.
HPLC har använts för olika tillämpningar som analys av vitamin D-nivåer i blod, illegal droganvändning av idrottare genom att detektera drogrester i urinen, sortera ut beståndsdelarna i ett komplext biologiskt prov för forskningsändamål och analys och tillverkning av läkemedel.
Vad är LCMS?
Vätskekromatografi–masspektrometri (LCMS) är en analytisk teknik som kombinerar vätskekromatografins fysiska separationsförmåga med massanalysförmågan hos masspektrometri (MS). Vätskekromatografi är en separationsteknik och masspektrometri används för att analysera mass-till-laddning-förhållandet av laddade partiklar. Den fysiska separationen uppnås vanligtvis med HPLC och alternativt LCMS även känt som HPLC-MS. LCMS är en dominerande analysteknik som har en mycket hög noggrannhet, känslighet och specificitet jämfört med HPLC. Således är den användbar i många tillämpningar såsom forskningsändamål, läkemedelsanalys, livsmedelsanalys, etc. LCMS används huvudsakligen för att separera, detektera, identifiera och kvantifiera biokemiska egenskaper hos ett visst prov i närvaro av komplexa kemiska blandningar.
Vad är skillnaden mellan HPLC och LCMC?
Akronym och definition av HPLC och LCMC
HPLC: HPLC står för High-Performance Liquid Chromatography. Det är en separationsteknik som huvudsakligen används för att separera komponenterna, för att identifiera och kvantifiera varje komponent i en blandning.
LCMS: LCMS står för Liquid Chromatography and Mass Spectrometry. Det är en analytisk teknik som kombinerar vätskekromatografins fysiska separationsförmåga med masspektrometrins (MS) massanalysförmåga.
Egenskaper för HPLC och LCMC
Klassificering
HPLC: Detta är endast en vätskekromatografimetod.
LCMS: Detta är en kombination av vätskekromatografimetoden och masspektrometrimetoden.
Effektivitet
HPLC: Jämfört med LCMS är HPLC-analysen mindre effektiv och långsammare.
LCMS: Jämfört med HPLC är LCMS-analysen effektiv och snabbare.
Känslighet
HPLC: Jämfört med LCMS är HPLC-analysen mindre känslig.
LCMS: Jämfört med HPLC är LCMS-analysen känsligare.
Specificity
HPLC: Jämfört med LCMS är HPLC-analysen mindre specifik.
LCMS: Jämfört med HPLC är LCMS-analysen mer specifik.
Noggrannhet
HPLC: HPLC ger mindre exakta resultat än LCMS för bestämning av vissa kemikalier.
LCMS: LCMS ger mer exakta resultat än HPLC för bestämning av vissa kemikalier.
Component
HPLC: HPLC kan betraktas som en komponent i LCMS.
LCMS: LCMS kan inte betraktas som en komponent i HPLC.
jonkälla
HPLC: Jonkälla finns inte i HPLC-instrument.
LCMS: Jonkälla finns i LCMS-instrumentet.
Applications
HPLC: Joner, polymerer, organiska molekyler och biomolekyler kan analyseras med HPLC.
LCMS: Organiska molekyler och biomolekyler kan analyseras. I motsats till HPLC kan LCMS användas för att undersöka ofullständigt upplösta blandningar.
Operation
HPLC: Diagrammet för ett HPLC-instrument ges i figur 1, och det inkluderar vanligtvis en autosampler, pumpar och en detektor. Provtagaren inför provblandningen i den mobila fasen (trycksatt blandning av lösningsmedel såsom vatten, acetonitril och/eller metanol) som överför den till kolonnen. Pumparna levererar önskat flöde och sammansättning av den mobila fasen genom kolonnen. Kolonnen är fylld med adsorbenten, som är en kornig fast partikel såsom kiseldioxid eller polymerer. Detektorn producerar en signal som är proportionell mot mängden provbeståndsdelar som finns i kolonnen, vilket möjliggör kvantifierbar analys av de valda provbeståndsdelarna. HPLC-instrumentet styrs och dataanalys tillhandahålls av en digital mikroprocessor och användarprogramvara.
Figur 1: Diagram över HPLC-instrument
LCMS: Diagrammet för LCMS-instrumentet ges i figur 2. Provextraktet infogas i kolonnen som består av HPLC. Denna kolumn behåller provmetaboliter baserat på fysiska egenskaper, och olika metaboliter strömmar till masspektrometern vid olika tidsintervall. Masspektroskopi används för att bedöma massor av partiklar, för att bestämma elementarrangemanget hos en molekyl och för att klargöra molekylstrukturerna. Provet bör dock joniseras för att generera laddade molekyler för att bestämma deras mass-till-laddning-förhållanden. Därför, istället för HPLC-instrument, består LCMS ytterligare tre moduler såsom järnkälla, en massanalysator och en detektor. En jonkälla kan omvandla gasfasprov till joner och en massanalysator som grupperar jonerna efter deras massor med hjälp av elektromagnetiska fält. Slutligen kvantifierar en detektor värdena och levererar data för varje jon som finns i provet. LCMS-tekniken kan användas för både kvalitativa och kvantitativa tillämpningar.
Figur 2: Diagram över LCMS-instrument
Sammanfattningsvis är HPLC en vätskekromatografimetod medan LCMS är en kombination av vätskekromatografi och masspektrometri. Båda dessa analystekniker har olika egenskaper, men de kan användas för att identifiera och kvantifiera livsmedelskompositioner, läkemedel och andra bioaktiva molekyler.
