Nyckelskillnaden mellan RIA och ELISA är att radioimmunoassay (RIA) är en immunanalysteknik som använder radioisotoper för att detektera antigen-antikroppskomplex medan enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA) är en immunanalysteknik som använder enzymer för att detektera antigen -antikroppskomplex.
Detektion av specifika proteiner såsom antigener är extremt viktigt vid sjukdomsdiagnostik. Därför är RIA och ELISA två immunanalystekniker som används i laboratorier för att snabbt detektera specifika proteiner, särskilt antigener. I allmänhet binder en specifik antikropp till målantigenet och bildar ett synligt komplex som kallas precipitin. Dessa antikroppar och antigenkomplex kan identifieras genom olika tekniker. Tekniken att detektera antigen-antikroppskomplexet genom att använda radioisotoper är känd som RIA, och tekniken för att detektera antigen-antikroppskomplexet genom att använda enzymer är känd som ELISA.
Vad är RIA?
Radioimmunoassay (RIA) är en immunanalysteknik som detekterar antigen- och antikroppskomplex med hjälp av radioisotoper. Rosalyn Sussman Yalow utvecklade denna teknik 1960 med hjälp av Solomon Berson. För denna anmärkningsvärda upptäckt vann Rosalyn Sussman Yalow Nobelpriset i medicin 1977. I radioimmunanalys görs vanligtvis en känd mängd av ett antigen först radioaktivt. Denna teknik använder ofta gamma-radioaktiva isotoper av jod, kallade 125-I, för att märka antigener. Dessa radioisotoper fäster norm alt till antigenets tyrosinaminosyra. Sedan blandas det radiomärkta antigenet med antikropp. Som ett resultat binder det radiomärkta antigenet och antikroppen specifikt till varandra.
Senare tillsätts ett serumprov som innehåller en okänd mängd av samma antigen. Detta får det omärkta antigenet från serumet att konkurrera med det radiomärkta antigenet om antikroppsbindningsställen. När koncentrationen av omärkt antigen ökar, binder mer av det till antikroppen och ersätter den radiomärkta varianten. Således minskar det förhållandet mellan antikroppsbundet radiomärkt antigen och fritt radiomärkt antigen. I slutet av proceduren separeras de bundna antigenerna. I slutändan mäts radioaktiviteten hos fria antigener i den återstående supernatanten med en gammaräknare.
Vad är ELISA?
ELISA är en immunanalysteknik som detekterar antigen- och antikroppskomplex med hjälp av enzymer. Det är en biokemisk analytisk analys som först beskrevs av Engvall och Perlmann 1971. I de flesta enkla former av ELISA-tekniker fästs antigener från patientprovet på en fast yta. Sedan appliceras en matchande antikropp över ytan, så att den kan binda till antigenet.
Figur 01: ELISA
Denna speciella antikroppen är kopplad till ett enzym. Senare avlägsnas eventuella obundna antikroppar genom tvättning med tvättmedel. I det sista steget av denna teknik tillsätts enzymets substrat. Om det finns en korrekt bindning av antigen och antikropp, producerar den efterföljande reaktionen en detekterbar färgsignal, oftast en färgförändring.
Vilka är likheterna mellan RIA och ELISA?
- RIA och ELISA är immunanalystekniker.
- Båda teknikerna har antigen- och antikroppskomplexbildning.
- De här teknikerna kan användas för att detektera okända proteiner i prover.
- De används båda för diagnos av sjukdomar i laboratorier.
- Båda är mycket specifika och känsliga tekniker.
Vad är skillnaden mellan RIA och ELISA?
RIA är en immunanalysteknik för att detektera antigen-antikroppskomplexet genom att använda radioisotoper. ELISA är en immunanalysteknik för att detektera antigen-antikroppskomplexet med hjälp av enzymer. Så detta är nyckelskillnaden mellan RIA och ELISA. Dessutom, i RIA-tekniken är antigenet märkt, men i ELISA är antikroppen märkt. Vidare, i RIA-tekniken, är märkningsmolekyler radioisotoper, medan märkningsmolekyler i ELISA är enzymer. Detta är alltså ytterligare en skillnad mellan RIA och ELISA.
Infografiken nedan visar fler skillnader mellan RIA och ELISA i tabellform.
Sammanfattning – RIA vs ELISA
Immunanalyser spelar en mycket viktig roll i olika bioanalytiska miljöer, såsom klinisk diagnostik, biofarmaceutisk analys, miljöövervakning, biosäkerhet och livsmedelstester. Sedan 1960-talet har ett brett utbud av immunanalyser utvecklats. RIA och ELISA är båda immunanalystekniker. RIA är en immunanalysteknik för att detektera antigen-antikroppskomplex genom att använda radioisotoper. ELISA är en immunanalysteknik för att detektera antigen-antikroppskomplex med hjälp av enzymer. Detta är alltså sammanfattningen av skillnaden mellan RIA och ELISA.
