nyckelskillnad – immuncytokemi vs immunhistokemi
Immunocytokemi (ICC) och Immunohistokemi (IHC) är två mycket använda tekniker inom molekylär diagnostik, som identifierar och bekräftar förekomsten av både icke-smittsamma sjukdomar och smittsamma sjukdomar baserat på de molekylära markörerna som finns på celler. Nyckelskillnaden mellan immuncytokemi och immunhistokemi är molekylen som används som analysförfarande i dessa tekniker. I ICC används primära och sekundära antikroppar konjugerade med markörer såsom fluorescens medan IHC, monoklonala och polyklonala antikroppar används för de diagnostiska bestämningarna.
Vad är immuncytokemi (ICC)?
ICC använder primära och sekundära antikroppar bundna till markörer som fluorescerande markörer eller enzymer och är en kraftfull detektionsmetod för att detektera antigener som finns på målceller som antingen kan vara infektiösa cellpartiklar eller cancertumörceller. Tre typer av kontroller krävs för immuncytokemi.
- Primary Antibody – kontroll som visar specificiteten hos den primära antikroppen som binder till antigenet
- Sekundär antikropp – kontroll som visar att etiketten är specifik för den primära antikroppen
- Etikettkontroller – visa att märkningen är resultatet av etiketten som lagts till och inte resultatet av endogen märkning.
Figur 01: Immuncytokemi märker enskilda proteiner i celler (här visas tyrosinhydroxylas i axonerna hos sympatiska autonoma neuroner i grönt).
Den primära antikroppskontrollen är specifik för varje ny antikropp och kan inte upprepas för varje experiment. Den sekundära antikroppskontrollen är utformad baserat på den primära antikroppen som används i experimentet och ingår i varje experiment. Märkningskontrollen ingår om ett villkor för proceduren ändras, provet ändras eller när oväntad märkning hittas.
De två huvudsakliga tillämpningarna av ICC är Radio Immuno – Assay (RIA) och Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Den vanligaste antikroppen som används är immunglobulinet G.
Vad är immunhistokemi (IHC)?
Inom immunhistokemi innehåller källprovet monoklonala och polyklonala antikroppar för att fastställa närvaron av antigener i främmande celler. Denna teknik är baserad på den specifika reaktionen av antigen-antikroppsbindning. Antikropparna som används vid detektion kan märkas med olika markörer; de kan vara fluorescensmarkörer, radiomärkta markörer eller kemiska markörer. Genom att underlätta in vitro-bindning mellan antigenet och den riktade antikroppen kan närvaron eller frånvaron av ett visst protein i en cell bestämmas.
Figur 02: Immunhistokemisk färgning av normal njure med CD10
För närvarande är forskare involverade i att utveckla målantikroppar för specifika antigener som finns i celler som antingen kan utvecklas som maligna tumörceller eller antigener som finns i smittämnen som HIV.
Vilka är likheterna mellan immuncytokemi och immunhistokemi?
- Reaktionerna är mycket specifika och korrekta i ICC och IHC.
- Tillämpningarna av ICC och IHC inkluderar diagnostik av cancer och infektionssjukdomar.
- Sterila förhållanden bör upprätthållas under båda förhållanden, och de bör utföras in vitro
- Båda teknikerna ger reproducerbara resultat.
- Båda är snabba.
- Radiomärkning, fluorescenstekniker används som detektionsmetoder i både ICC och IHC.
- Båda är baserade på antigen-antikroppparning.
Vad är skillnaden mellan immuncytokemi och immunhistokemi?
Immunocytokemi (ICC) vs Immunohistokemi (IHC) |
|
| ICC använder primära och sekundära antikroppsbundna markörer som fluorescerande markörer eller enzymer och är en kraftfull detektionsmetod för att detektera antigener som finns på målceller. | IHC är en metod som använder monoklonala och polyklonala antikroppar för att bestämma närvaron av antigener som är speciella proteinmarkörer placerade på cellytorna. |
| Exempelkälla | |
| Prover från vävnader som har bearbetats histologiskt till tunna sektioner används i ICC. | IHC använder prover som består av celler odlade i ett monolager eller celler i suspension som deponeras på ett objektglas. |
| Provbearbetning | |
| I ICC bör celler vara permeabla för att underlätta antikroppspenetration till de intracellulära målen. | I IHC är celler formalinfixerade, paraffininbäddade innan färgning. |
Sammanfattning – Immuncytokemi vs immunhistokemi
Molekylär diagnostik används för att identifiera och bekräfta förekomsten av både icke-smittsamma sjukdomar och smittsamma sjukdomar baserat på de molekylära markörer som finns på celler. Molekylära markörer kan vara proteiner eller sekvenser av DNA eller RNA; utvecklingen av teknologier som ICC och IHC har banat väg för forskare att identifiera sjukdomen och dess orsak i ett tidigt skede. Både ICC och IHC beror på de specifika reaktionerna mellan antikropp och antigen även om provkällan. Den största skillnaden mellan immuncytokemi och immunhistokemi är provbearbetningen av de två procedurerna.
Ladda ned PDF-version av immuncytokemi vs immunhistokemi
Du kan ladda ner PDF-versionen av den här artikeln och använda den för offlineändamål enligt citat. Ladda ner PDF-versionen här Skillnaden mellan immuncytokemi och immunhistokemi.
