nyckelskillnad – monolager vs suspensionskultur
Vävnadskultur är en metod som används för att inducera tillväxten av celler som är separerade från organismen och som odlas i olika odlingsmedier. I vävnadsodling spelar odlingsmedierna en viktig roll. Olika celler växer i olika odlingsmedier beroende på cellens fysiologiska och kemiska egenskaper. Monolagerkultur och suspensionskultur är två huvudtyper av kulturer som används under vävnadsodlingsprocessen. En monolagerkultur är en förankringsberoende kultur där cellen växer medan den är fäst vid ett substrat och suspensionskultur är en förankringsoberoende kultur där cellaggregat används för att etablera cellkulturer i flytande media. Detta är den viktigaste skillnaden mellan monolagerkultur och suspensionskultur.
Vad är monolagerkultur?
Monolagerkultur definieras som en typ av kultur där celler odlas i ett enda lager på en kolv eller petriskål som innehåller odlingsmediet. Monolagerkultur kallas också adherent kultur eller förankringsberoende kultur. Anledningen till att man hänvisar till adherent eller förankringsberoende kultur är att dessa celler behöver ett substrat för vidhäftning under sin tillväxt. De fäster vid cellkulturen som innehåller substratet.
Substraten som används i odlingsmediet bör laddas före användning. Dessa laddade substrat främjar interaktioner mellan celler. Elektriska jonurladdningar, tvåvärda katjonbeläggningar och gammastrålning är de källor som används för att ladda dessa substrat. I monolagerodlingsmedium, när cellerna väl har inokulerats, regleras tillväxten med användning av den process som kallas kontakthämning. Under kontaktinhibering stoppas celltillväxten för att stoppa prolifereringen av normala celler när de väl bildar ett monolager fäst vid ytan.
Figur 01: Adherent Culture
De celler som är beroende av andra substrat för vidhäftning kallas vidhäftande celler. Dessa vidhäftande celler härrör ofta från organvävnader såsom njurar etc. Dessa celler är orörliga och är vanligtvis fästa vid bindväven. Därför bör alla dessa väsentliga tillväxtfaktorer tillhandahållas när dessa celler odlas på odlingsmedia. Vikten av monolagerkultur är att den efterliknar de ursprungliga naturliga förhållandena för att cellen ska kunna etablera sig ordentligt.
Vad är suspensionskultur?
En suspensionskultur skulle kunna definieras som en typ av kultur där multiplikation av små aggregat av celler eller enstaka celler sker suspenderad i ett flytande medium som ständigt omrörs. I andra termer är suspensionskultur också känd som cellkultur av cellsuspensionskultur. Denna odling hjälper till att etablera encellskulturer som skulle kunna användas vid undersökning av växtceller med avseende på deras olika potentialer och egenskaper. Undersökning om denna aspekt skulle kunna användas för att förstå det inbördes förhållandet mellan celler och deras inflytande när det gäller flercelliga organismer.
Under den initiala växtutvecklingen bildas en kallus som är en massa odifferentierade celler. Denna tillväxtnivå orsakar hinder för identifiering av cellulära händelser under växtens tillväxt- och utvecklingsfaser. Suspensionskultur introducerades för att övervinna denna situation eftersom den gav ett utmärkt odlingsmedium för etablering av encellskulturer från små cellaggregat erhållna från kallus. Detta användes för att studera olika morfologiska och biokemiska aspekter under de inledande stadierna av en växts utveckling.
Figur 02: Suspensionskultur
I sammanhanget för att erhålla en idealisk cellodling är den typiska metoden att överföra en spröd massa av kallus till ett omrört flytande medium där massan bryts och lätt dispergeras. Efteråt sållas de stora kallus bort och behåller små cellaggregat och enstaka celler. Sedan överförs dessa celler till ett annat medium. Aktivt växande celler erhålls efter två till tre veckor.
Vilka är likheterna mellan monolager- och suspensionskultur?
- Både monolager- och suspensionskulturer är två typer av cellkulturer som används för etablering av cell
- Både monolager- och suspensionstyper av kulturer odlas på lämpligt odlingsmedium.
- Både monolager- och suspensionskulturer används ofta i vävnadsodling.
Vad är skillnaden mellan monolager- och suspensionskultur?
Monolayer vs Suspension Culture |
|
| En monolagerkultur är en förankringsberoende kultur där cellerna odlas medan de är fästa vid ett substrat. | Suspensionskultur är en förankringsoberoende kultur där multiplikation av små aggregat av celler eller enstaka celler sker suspenderad i ett flytande medium som skakas. |
| Krav | |
| Monolagerodling kräver ett vävnadskulturbehandlat kärl med periodisk passage. | Suspensionsodling kan uppnås med icke-vävnadskulturbehandlade kärl. |
| Tillväxtbegränsningar | |
| Tillväxten av monolagerkultur kommer att begränsas av den yta som direkt påverkar avkastningen. | Tillväxtbegränsning av suspensionskulturen sker genom koncentrationen av celler i mediet. |
| Celldissociation | |
| Celldissociation sker mekaniskt eller enzymatiskt i monolagerkultur. | Suspensionskultur kräver inte hjälp av enzymer och mekaniska medel för celldissociation. |
| Cellvisualisering | |
| Monolagerkultur möjliggör enkel visualisering av celler. | Det är svårare att se celler i suspensionskulturer. |
| Function | |
| Monolagerkultur används inom områdena cytologi, forskning och kontinuerlig produktskörd. | Suspensionskultur används för bulkproduktion av proteiner, forskningsstudier och batchskörd. |
Sammanfattning – Monolager vs Suspension Culture
Monolagerkultur och suspensionskultur är två huvudkulturer som används i vävnadsodling. Enskiktskulturen är en förankringsberoende kultur. Cellerna odlas i denna kultur där de är fästa till ett substrat som finns i kulturen. Substraten laddas före användning med inblandning av olika källor såsom tvåvärda beläggningar och jonurladdning. Suspensionskulturer är förankringsoberoende kulturer där cellerna växer utan hjälp av ett substrat för fästning. Denna odling hjälper till att etablera encellskulturer som skulle kunna användas vid undersökning av växtceller med avseende på deras olika potentialer och egenskaper. Detta är skillnaden mellan monolagerkultur och suspensionskultur.
