nyckelskillnad – flödescytometri vs FACS
I samband med cellteori är celler den grundläggande strukturella och funktionella enheten för alla levande organismer. Cellsortering är en metod som används för att separera olika celler enligt de fysiologiska och morfologiska egenskaperna. De kan ha intracellulära eller extracellulära egenskaper. Interaktion mellan DNA, RNA och proteiner betraktas som intracellulära interaktiva egenskaper medan formen, storleken och olika ytproteiner betraktas som extracellulära egenskaper. I dagens vetenskap har cellsorteringsmetoder lett till att hjälpa olika undersökningar i biologiska studier och även i etableringen av nya principer genom forskning om medicin. Cellsortering utförs på olika metoder som inkluderar både primitiva med mindre utrustning och avancerade tekniska metoder med användning av sofistikerade maskiner. Flödescytometri, fluorescerande aktiverad cellsortering (FACS), magnetisk cellurval och singelcellssortering är de viktigaste metoderna som används. Flödescytometri och FACS är utvecklade för att differentiera celler enligt deras optiska egenskaper. FACS är en specialiserad typ av flödescytometri. Flödescytometri är en metod som används vid analys av en heterogen population av celler enligt olika cellytemolekyler, storlek och volym som möjliggör undersökning av enstaka celler. FACS är en process genom vilken en provblandning av celler sorteras enligt deras ljusspridnings- och fluorescensegenskaper i två eller flera behållare. Detta är den viktigaste skillnaden mellan flödescytometri och FACS.
Vad är flödescytometri?
Flödescytometri är en metod som används för att undersöka och bestämma uttrycket av intracellulära molekyler och cellytan samt för att definiera och karakterisera distinkta celltyper. Det används också för att bestämma cellvolymen och cellstorleken och för att utvärdera renheten hos subpopulationer som är isolerade. Detta möjliggör utvärdering av flera parametrar av enstaka celler vid ungefär samma tidpunkt. Flödescytometri används för att mäta intensiteten av fluorescens som produceras på grund av fluorescensmärkta antikroppar som hjälper till att identifiera proteiner eller ligander som binder till associerade celler.
Figur 01: Flödescytometri
Flödescytometri omfattar i allmänhet tre delsystem huvudsakligen. De är fluidiken, elektroniken och optiken. Inom flödescytometri finns fem huvudkomponenter tillgängliga som används vid cellsortering. De är en flödescell (en ström av vätska som används för att transportera dem och rikta in cellerna för optisk avkänningsprocess), ett mätsystem (kan vara av olika system inklusive kvicksilver- och xenonlampor, vattenkylda med hög effekt eller lågeffekt luftkylda lasrar eller diodlasrar), en ADC; Analog till Digital Converter system, förstärkningssystem och en dator för analys. Förvärvet är den process genom vilken data samlas in från proverna med hjälp av flödescytometer. Denna process förmedlas av en dator som är ansluten till flödescytometern. Mjukvaran som finns i datorn analyserar informationen som matas till datorn från flödescytometern. Programvaran har också förmågan att justera parametrar för experimentet som styr flödescytometern.
Vad är FACS?
I samband med flödescytometri är fluorescensaktiverad cellsortering (FACS) en metod som används för att differentiera och sortera ett prov av en blandning av biologiska celler. Cellerna separeras från två eller flera behållare. Sorteringsmetoden är baserad på cellens fysiska egenskaper som inkluderar ljusspridning och fluorescensegenskaper hos cellen. Detta är en viktig vetenskaplig teknik som kan användas för att erhålla tillförlitliga kvantitativa och kvalitativa resultat av fluorescenssignaler som emitteras från varje cell. Under FACS, initi alt, den i förväg erhållna blandningen av celler; en suspension riktas mot mitten av en smal ström av vätska som strömmar snabbt. Vätskeflödet är utformat för att separera cellerna i suspensionen baserat på diametern på varje cell. En vibrationsmekanism appliceras på suspensionsströmmen vilket resulterar i bildandet av individuella droppar.
Figur 02: FACS
Systemet är kalibrerat för att skapa en enda droppe med en cell. Strax före bildandet av droppar rör sig flödessuspensionen längs en fluorescensmätningsapparat som detekterar fluorescensegenskaperna för varje cell. Vid punkten för bildandet av droppar placeras en elektrisk laddningsring som en laddning induceras till ringen innan mätningen av fluorescensintensiteten. När dropparna väl har bildats från suspensionsströmmen, fångas en laddning inuti dropparna som sedan går in i ett elektrostatiskt avböjningssystem. Enligt åtalet leder systemet bort dropparna i olika behållare. Metoden för applicering av avgiften varierar beroende på olika system som används i FACS. Utrustningen som används i FACS är känd som en fluorescensaktiverad cellsorterare.
Vad är likheten mellan flödescytometri och FACS?
Flödescytometri och FACS har utvecklats för att differentiera celler enligt deras optiska egenskaper
Vad är skillnaden mellan flödescytometri och FACS?
Flödescytometri vs FACS |
|
| Flödescytometri är en metod som används vid analys av en heterogen population av celler enligt olika cellytemolekyler, storlek och volym som möjliggör undersökning av enstaka celler. | FACS är en process genom vilken en provblandning av celler sorteras enligt deras ljusspridnings- och fluorescensegenskaper i två eller flera behållare. |
Sammanfattning – Flödescytometri vs FACS
Cellen är den grundläggande strukturella och funktionella enheten för alla levande organismer. Cellsortering är den process genom vilken celler isoleras och differentieras i olika kategorier baserat på deras intracellulära och extracellulära egenskaper. Flödescytometri och FACS är två viktiga metoder för cellsortering. Båda processerna är utvecklade för att differentiera celler efter deras optiska egenskaper. Flödescytometri är en metod som används vid analys av en heterogen population av celler enligt olika cellytemolekyler, storlek och volym som möjliggör undersökning av enstaka celler. FACS är en process genom vilken en provblandning av celler sorteras enligt deras ljusspridnings- och fluorescensegenskaper i två eller flera behållare. Det här är skillnaden mellan flödescytometri och FACS.
Ladda ned PDF-versionen av flödescytometri vs FACS
Du kan ladda ner PDF-versionen av den här artikeln och använda den för offlineändamål enligt citat. Ladda ner PDF-versionen här Skillnaden mellan flödescytometri och FACS
