Nyckelskillnaden mellan jonpar- och jonbyteskromatografi är att i jonparkromatografi kan joner i provet "paras ihop" och separeras som jonparet medan joner i provet vid jonbyteskromatografi kan separeras som katjoner och anjoner separat.
Kromatografi är en viktig teknik som leder till separation av olika komponenter i en blandning. Jonpar- och jonbyteskromatografi är analytiska tekniker som vi kan använda för att separera joner och polära molekyler i en blandning, baserat på den elektriska laddning som de bär med sig.
Vad är jonparkromatografi?
Jonparkromatografi är en analytisk teknik där joner i provet paras ihop och separeras som jonpar. Jonparning avser neutraliseringen; när katjoner parar sig med anjoner neutraliseras deras elektriska laddningar. Här görs denna separationsteknik i en omvänd faskolonn. I denna process måste vi använda jonparningsmedel för att bilda jonpar och separera jonerna i provet. Vanligtvis är de jonparande medlen föreningar som innehåller kolvätekedjor. Dessa jonparande medel bör ha motsatt elektrisk laddning till den hos jonerna i provet; annars kommer joner inte att paras (joner med samma laddning paras inte, eftersom de stöter bort varandra). Dessutom kan dessa jonparande medel också öka hydrofobiciteten och retentionen.
Användning av jonpar-medel som den mobila fasen gör det dessutom möjligt för oss att enkelt separera joniska och mycket polära ämnen. Till exempel, om vi lägger till ett reagens som har en hydrofob funktionell grupp, kan den stationära fasen behålla denna hydrofoba funktionella grupp; sålunda hålls parade joner också kvar på den stationära fasen tillsammans med den tillsatta hydrofoba funktionella gruppen. 1-pentylnatriumsulfonat och 1-hexylnatriumsulfonat är viktiga som de anjoniska motjonerna för katjonerna som finns i provet och 1-pentansulfonat är viktigt som en katjonisk motjon för anjoner.
Fördelar med jonparkromatografi
Det finns flera fördelar med jonparkromatografi jämfört med jonbyteskromatografi;
- Lätt att förbereda nödvändiga buffertlösningar
- Kan välja ett brett utbud av kolkedjelängder i jonparningsmedel
- Resultaten är mycket reproducerbara
- Kan få en förbättrad toppform
- Reducerad separationstid
Vad är jonbyteskromatografi?
Jonbyteskromatografi är en form av vätskekromatografi där vi kan analysera joniska ämnen. Vi använder det ofta för att analysera oorganiska anjoner och katjoner (dvs klorid- och nitratanjoner och kalium-, natriumkatjoner). Även om det är mindre vanligt, kan vi analysera organiska joner också. Dessutom kan vi använda denna teknik för rening av proteiner eftersom proteiner är laddade molekyler vid vissa pH-värden. Här använder vi en fast stationär fas till vilken de laddade partiklarna kan fästa. Till exempel kan vi använda hartset polystyren-divinylbensen-sampolymerer som fast underlag.
För att förklara detta ytterligare har den stationära fasen fixerade joner såsom sulfatanjoner eller kvartära aminkatjoner. Var och en av dessa bör associeras med en motjon (en jon med motsatt laddning) om vi ska behålla neutraliteten i detta system. Om motjonen är en katjon, benämner vi systemet som ett katjonbytarharts. Men om motjonen är en anjon är systemet ett anjonbytarharts. Dessutom finns det fem huvudsteg i jonbyteskromatografi:
- Inledande skede
- Adsorption av målet
- Start av eluering
- Slut på eluering
- Regeneration
Vad är skillnaden mellan jonpar- och jonbyteskromatografi?
Jonpar- och jonbyteskromatografier är analytiska tekniker som vi kan använda för att separera jonerna och de polära molekylerna i en blandning. Den viktigaste skillnaden mellan jonpar och jonbyteskromatografi är att vi i jonparkromatografi kan göra joner i provet "parade" och separera det som jonpar, medan vi vid jonbyteskromatografi kan separera jonerna i provet som katjoner och anjoner separat.
Infografiken nedan visar fler jämförelser relaterade till skillnaden mellan jonpar- och jonbyteskromatografi.
Sammanfattning – jonpar vs jonbyteskromatografi
Jonpar- och jonbyteskromatografi är analytiska tekniker som vi kan använda för att separera jonerna och de polära molekylerna i en blandning. Den viktigaste skillnaden mellan jonpar och jonbyteskromatografi är att i jonparkromatografi kan joner i provet "paras ihop" och separeras som jonparet medan joner i provet kan separeras som katjoner i jonbyteskromatografi och anjoner separat.