Nyckelskillnaden mellan progressiv och regressiv färgning är att vid progressiv färgning lämnas vävnaden i färgningslösningen precis tillräckligt länge för att nå önskad slutpunkt medan vid regressiv färgning lämnas vävnaden medvetet för överfärgning tills färgen mättar alla vävnadselement och avfärgas sedan.
Fläckning är en teknik som framhäver och differentierar vävnadskomponenter och gör det möjligt att observera under mikroskop. H- och E-färgning är den allmänna vävnadsfärgningsprocedur som används mest inom histologi. Den använder hematoxylin och eosin (motfärgning). Nukleär färgning med användning av hematoxylin kan åstadkommas med progressiva eller regressiva färgningstekniker. Vissa hematoxylinformuleringar används vid progressiv färgning. Mayers hematoxylin är ett exempel. Progressiva fläckar har en låg hematoxylinkoncentration. Därför färgar de långsamt och selektivt kromatinet. Vissa andra formuleringar används vid regressiv färgning. Harris hematoxylin används vid regressiv färgning. Regressiva fläckar har en hög koncentration av hematoxylin; därför diffunderar fläcken snabbt över hela cellen.
Vad är progressiv färgning?
Progressiv färgning är en teknik som tillåter vävnaden i färgningslösningen precis tillräckligt länge för att nå önskad slutpunkt. Därför behövs frekvent övervakning av fläckens kvalitet för att bestämma slutförandet av färgningen. Färgningsintensiteten styrs av nedsänkningstiden.
Figur 01: Haematoxylin-struktur
Gills hematoxylin och Mayers hematoxylin är progressiva till sin natur. För dessa två hematoxylingar används vanligtvis en färgningstid på 5-10 minuter vid progressiv färgning. I allmänhet är progressiva hematoxyliner mindre koncentrerade. Därför färgar de långsamt och selektivt kromatin. Vid progressiv färgning färgar hematoxylin främst kromatinet till önskad intensitet. Det krävs alltså inte differentiering i utspädd sur alkohol för att dra ut överskottsfläcken.
Vad är regressiv färgning?
Regressiv färgning är en snabbare färgningsteknik där vävnaden medvetet överfärgas tills färgen mättar alla vävnadskomponenter. Sedan avfärgas vävnaden selektivt tills den når rätt slutpunkt. Avfärgningssteg kallas differentiering. Differentiering görs för att ta bort överflödiga fläckar. Vanligtvis görs det med utspädd sur alkohol.
Figur 02: H- och E-färgning
Harris hematoxylin är den populärt använda typen av hematoxylin. Ehrlichs och Delafields hematoxyliner används också vid regressiv färgning. Regressiva fläckar har en hög koncentration av hematoxylin. Därför diffunderar de snabbt hela cellen och överfärgar kromatinet och cytoplasman. Regressiv färgning är att föredra när mycket tydlig differentiering av vävnadselement krävs.
Vilka är likheterna mellan progressiv och regressiv färgning?
- Progressiv och regressiv färgning är två typer av färgningstekniker.
- Båda använder färgämnet hematoxylin.
Vad är skillnaden mellan progressiv och regressiv färgning?
Progressiv färgning är en långsammare färgningsprocess där vävnaden lämnas i färgningslösningen precis tillräckligt länge för att nå önskad slutpunkt. Däremot är regressiv färgning en snabbare färgningsprocess där vävnaden medvetet överfärgas och sedan avfärgas. Så detta är den viktigaste skillnaden mellan progressiv och regressiv färgning.
En annan signifikant skillnad mellan progressiv och regressiv färgning är dessutom att progressiv färgning inte kräver ett extra steg som kallas differentiering, medan regressiv färgning kräver differentiering för att ta bort överflödiga fläckar. Dessutom har progressiva fläckar en låg koncentration av hematoxyliner, medan regressiva fläckar har en högre koncentration av hematoxyliner.
Infografiken nedan visar fler skillnader mellan progressiv och regressiv färgning.
Sammanfattning – progressiv vs regressiv färgning
Progressiv färgning är en långsam färgningsteknik där vävnaden lämnas i färgningslösningen precis tillräckligt länge för att nå slutpunkten. Därför överfärgning görs inte är progressiv färgning. Däremot är regressiv färgning en snabbare färgningsteknik där vävnaden överfärgas och sedan avfärgas. Progressiv färgning kräver inte differentiering (borttagning av överflödig fläck) medan regressiv färgning kräver differentiering i utspädd sur alkohol för att ta bort överflödig fläck. Progressiva fläckar har i allmänhet en låg koncentration av hematoxyliner medan regressiva fläckar har mer koncentration av hematoxyliner. Detta sammanfattar alltså skillnaden mellan progressiv och regressiv färgning.
