Nyckelskillnaden mellan genamplifiering och genkloning är att genamplifieringen är processen att göra många kopior av genen av intresse in vitro genom en polymeraskedjereaktion. Men genkloning är en process för att göra många kopior av genen av intresse in vivo genom att göra en rekombinant plasmid och omvandla den till en värdbakterie.
En gen är ett specifikt fragment av DNA som kodar för ett protein. En organism har tusentals gener. Dessutom är det möjligt att multiplicera DNA-sekvenserna för viktiga gener med hjälp av molekylärbiologiska tekniker. Genamplifiering och genkloning är två sådana procedurer. Båda procedurerna producerar många kopior av en gen av intresse. Det finns dock en skillnad mellan genamplifiering och genkloning när det gäller deras metodik.
Vad är genförstärkning?
Genamplifiering är processen att göra kopior av en viss gen med hjälp av polymeraskedjereaktion. För att amplifiera en gen bör DNA från den specifika organismen extraheras med hjälp av ett lämpligt DNA-extraktionsprotokoll. Sedan bör det extraherade dubbelsträngade DNA:t denatureras för att erhålla separerade enkelsträngar. Nästa steg inkluderar användning av en PCR-reaktion för att göra kopior av genen av intresse. Dessutom innehåller PCR-blandningen nödvändiga primrar, nukleotider, DNA-polymerasenzym, mall-DNA och andra ingredienser. I slutet av PRC-programmet sker amplifiering av genen av intresse.
Figur 01: Genförstärkning
Dessutom är genamplifiering ett första steg i detektionen av en specifik sekvens, identifiering av en organism, diagnostisering av sjukdomar och skapande av genbibliotek, etc.
Vad är genkloning?
Genkloning är en metod inom genteknik för att göra genbibliotek eller göra många kopior av genen av intresse. Denna process involverar framställning av en rekombinant plasmid och transformering av den rekombinanta plasmiden till en värdcell, speciellt en bakteriecell. Klon är en identisk kopia av den ursprungliga organismen eller en molekyl. Genkloning kan göra tusentals genkloner.
Figur 02: Genkloning
När genen av intresse har identifierats kan den separeras från genomet hos en viss organism genom att begränsa den med specifika restriktionsenzymer. Använd sedan samma restriktionsenzym, plasmider (vektorer) bör öppnas för att infoga genfragmentet. Sedan omvandlas den rekombinanta plasmiden till en värdbakterie med hjälp av olika metoder såsom elektroporering. Några av de rekombinanta plasmiderna går in i värdbakterieceller. Med hjälp av ett antibiotikum kan de transformerade bakterierna selekteras, isoleras och odlas i färska medier. Den här tekniken hjälper alltså till att få miljontals genkloner.
Vilka är likheterna mellan genförstärkning och genkloning?
- Genamplifiering och genkloning är två molekylärbiologiska tekniker.
- I båda dessa tekniker multipliceras en viss DNA-sekvens eller en gen i miljoner eller tusentals gånger.
- Dessutom är båda teknikerna av yttersta vikt för många vetenskapliga områden.
Vad är skillnaden mellan genförstärkning och genkloning?
Genamplifiering är en process som gör kopior av en viss gen med hjälp av en in vitro-metod som kallas PCR. Å andra sidan är genkloning en process som gör kopior av en viss gen genom att använda in vivo-metoden genom att konstruera rekombinanta vektorer och multiplicera dem i levande organismer. Så detta är nyckelskillnaden mellan genamplifiering och genkloning. Dessutom tar genamplifiering bara några timmar medan genkloning tar flera dagar att slutföra. Därför kan vi också betrakta detta som en skillnad mellan genamplifiering och genkloning. Dessutom visar genamplifieringsprocessen färre fel, medan genkloningsprocessen visar fler fel.
Följande infografik sammanfattar skillnaden mellan genamplifiering och genkloning.
Sammanfattning – Genförstärkning vs genkloning
Genamplifiering är processen att göra kopior av den önskade genen med polymeraskedjereaktion under in vitro-förhållanden medan genkloning är processen att göra kopior av en gen av intresse med hjälp av en rekombinant DNA-molekyl och en levande organism/värd bakterie. Detta är alltså den grundläggande skillnaden mellan genamplifiering och genkloning.
