Nyckelskillnaden mellan kloningsvektor och expressionsvektor är att kloningsvektor bär ett främmande DNA-fragment in i värdcellen medan expressionsvektor underlättar uttrycket av gener i proteiner.
Vektor är en viktig term inom molekylärbiologi. I rekombinant DNA-teknik är huvudrollen för en vektor att tillhandahålla ett transportsätt till en användbar DNA-fraktion som ska infogas i en värdcell. Dessutom är det en DNA-molekyl som används för att bära ett främmande DNA-fragment artificiellt in i en värdcell för att uttryckas eller replikeras. Mest använda vektorer är plasmider, virala vektorer, kosmider och artificiella kromosomer. Kloningsvektor och expressionsvektor är två typer av vektorer som klassificeras baserat på deras tillämpningar.
Vad är en kloningsvektor?
En kloningsvektor är en del av DNA som kan användas för att infoga en främmande DNA-molekyl och har förmågan att infogas i en värd för kloningsändamål. En ideal egenskap hos en kloningsvektor är enkel insättning/borttagning av DNA-fragmentet genom restriktionsenzymbehandling och ligeringsenzymbehandling. I denna aspekt är ofta använda kloningsvektorer de genetiskt modifierade plasmiderna.
Figur 01: Kloningsvektor
En kloningsvektor bör ha ett multipelt kloningsställe, en selekterbar markörgen och en reportergen. Syftet med en kloningsplats är att tillhandahålla en plats där kloning kan ske. En selekterbar markörgen hjälper till att identifiera framgångsrika rekombinanter efter kloning och en reportergen tillåter screening och identifiering av den korrekta rekombinanten bland rekombinanterna efter kloning. Kloningsvektorn hjälper inte nödvändigtvis till att uttrycka ett protein som det främmande DNA kodar för. Sålunda är det enda syftet med kloningsvektorn att bära främmande DNA till värden.
Vad är en uttrycksvektor?
Expressionsvektor, även kallad expressionskonstruktion, är en typ av vektor som används för expression av proteiner inuti värdcellen. Som vilken vektor som helst bör denna också innehålla huvuddelarna ett multipelt kloningsställe, en markörgen och en reportergen. Vektorn introducerar en ny gen i värden och med hjälp av värdens proteinsyntesmekanism gör den att genen kan uttryckas i värden. Dessutom är dess initiala fokus att göra stabilt m-RNA och därigenom göra proteiner. Ett bra exempel är kommersiell produktion av insulin. Insulingenen introduceras till en bakteriell plasmid och infogas tillbaka i E.coli-bakteriekroppen, som låter plasmiderna föröka sig och låter E. coli växa och utsöndrar insulin som kan samlas in och användas.
Figur 02: Expressionsvektor
Dessutom bör en expressionsvektor ha en stark promotorregion, en korrekt translationsinitieringssekvens och ett korrekt terminatorkodon och en sekvens. Expressionsvektorer har många tillämpningar för att producera peptider och proteiner för läkemedelsindustrin, såsom att producera insulin, tillväxthormon, antibiotika, vacciner, antikroppar. Dessutom hjälper expressionsvektorer till enzymproduktion i livsmedels- och klädindustrin. Inte bara det, expressionsvektorer är väsentliga för att producera transgena växter som gyllene ris, insektsresistenta växter, herbicidresistenta växter, etc.
Vilka är likheterna mellan kloningsvektor och uttrycksvektor?
- Klonningsvektor och expressionsvektor är två typer av vektorer som vi använder i rekombinant DNA-teknik och genteknik.
- Båda innehåller en markörgen och en reportergen.
- Dessutom består de av flera kloningssidor.
- De har också ett ursprung för replikering och förmågan att replikera sig själv.
Vad är skillnaden mellan kloningsvektor och uttrycksvektor?
En kloningsvektor är en liten DNA-molekyl som bär ett främmande DNA-fragment in i värdcellen medan expressionsvektor är en typ av vektor som underlättar introduktion, expression av gener och produktion av proteiner. Så detta är nyckelskillnaden mellan kloningsvektor och expressionsvektor. Vidare är en annan signifikant skillnad mellan kloningsvektor och expressionsvektor att en kloningsvektor introducerar ett främmande DNA-fragment i en värd medan expressionsvektorer uttrycker den introducerade genen genom att producera det relevanta proteinet.
Dessutom består kloningsvektor av ett replikationsursprung, restriktionsställen och en valbar markör. Medan uttrycksvektorn innehåller förstärkare, promotorregion, termineringskodon, transkriptionsinitieringssekvens, ett replikationsursprung, restriktionsställen och en selekterbar markör. Därför är detta också en skillnad mellan kloningsvektor och expressionsvektor. Dessutom är plasmider, bakteriofager, bakteriella konstgjorda kromosomer, kosmider, konstgjorda däggdjurskromosomer, konstgjorda jästkromosomer, etc, exempel på kloningsvektorer. Under tiden är expressionsvektorer mestadels plasmider.
Sammanfattning – Cloning Vector vs Expression Vector
Baserat på deras funktion inom molekylärbiologi finns det två typer av vektorer som kloningsvektor och expressionsvektor. En kloningsvektor är en liten DNA-molekyl som levererar främmande DNA till värdcellen. Det finns olika typer av kloningsvektorer såsom plasmider, bakteriofager, bakteriella konstgjorda kromosomer, kosmider och konstgjorda däggdjurskromosomer. Däremot är en expressionsvektor en plasmid som introducerar genen av intresse i värdcellen och underlättar genuttrycket för att erhålla proteinprodukten. Expressionsvektorer är plasmider. Detta är alltså sammanfattningen av skillnaden mellan kloningsvektor och expressionsvektor.
