Nyckelskillnaden mellan differential- och densitetsgradientcentrifugering är att differentialcentrifugering separerar partiklar i en blandning baserat på partiklarnas storlek medan densitetsgradientcentrifugering separerar partiklar i en blandning baserad på partiklarnas densitet.
Centrifugering är en separationsmetod av olika komponenter i en analytblandning. Denna metod innebär att provet roteras runt en fast axel, vilket orsakar produktionen av en centrifugalkraft. Centrifugalkraften gör att partiklarna i provet rör sig ner genom ett flytande medium. Denna process orsakar sedimentering av partiklar eller celler med olika storlekar och densiteter i olika hastigheter.
Vad är differentiell centrifugering?
Differentialcentrifugering är en analysteknik där vi kan separera partiklarna i en blandning beroende på partikelstorleken. Det är den enklaste formen av centrifugering och kallas även differentiell pelletering. Denna metod är viktig för att separera komponenterna i en cell. Partiklar med olika storlekar genomgår sedimentering med olika hastigheter vid centrifugeringen. Med andra ord sedimenterar stora partiklar snabbare än mindre partiklar. Dessutom kan sedimentationshastigheten ökas genom att öka centrifugalkraften.
När man överväger dess tillämpningar är differentiell centrifugering användbar för att skörda celler eller producera råa subcellulära fraktioner från ett vävnadshomogenat. T.ex. ett leverhomogenat innehåller kärnor, mitokondrier, lysosomer och membranvesiklar. Om vi centrifugerar detta homogenat med låg hastighet och under en kort tid kan vi få de stora kärnorna som pelleten. Om vi använder hög centrifugalkraft kan vi få mitokondrier i pelleten. Biologiska prover är dock alltid benägna att kontamineras.
Vad är densitetsgradientcentrifugering?
Densitetsgradientcentrifugering är en analytisk teknik där vi kan separera partiklarna i analytblandningen baserat på partikelns densitet. I denna metod koncentreras ämnena i en lösning av cesiums alter eller i sackaros. Metoden innebär fraktionering av partiklar baserat på flyttäthet. Densitetsgradienten i denna metod är cesiums altet eller sackarosmediet. Det finns två typer av densitetsgradientcentrifugering: hastighet-zonla-centrifugering och isopycnisk centrifugering.
Den hastighetszonbaserade centrifugeringen involverar separationsmediet som har en skiktad struktur med en smal zon ovanpå densitetsgradienten. I denna process tenderar partiklarna att röra sig med olika hastigheter under centrifugalkraften beroende på partiklarnas densitet. Vanligtvis producerar alla partiklar pellets eftersom partiklarnas densitet är högre än densitetsgradienten.
Isopycnic centrifugering är den andra typen av densitetsgradientcentrifugeringsmetod. Det börjar med en homogen lösning. Under centrifugalkraften rör sig partiklarna i analytblandningen tills partiklarnas densitet liknar densitetsgradienten. Därför kan vi även kalla denna teknik för jämviktscentrifugering.
Vad är skillnaden mellan differential- och densitetsgradientcentrifugering?
Differential- och densitetsgradientcentrifugering är två typer av centrifugeringsprocesser involverade i separationen av komponenter i en analytblandning. Den viktigaste skillnaden mellan differential- och densitetsgradientcentrifugering är att differentialcentrifugering separerar partiklar i en blandning baserat på partiklarnas storlek medan densitetsgradientcentrifugering separerar partiklar i en blandning baserad på partiklarnas densitet.
Infografiken nedan visar fler skillnader mellan differential- och densitetsgradientcentrifugering.
Sammanfattning – Differential vs Density Gradient Centrifugation
Differential- och densitetsgradientcentrifugering är två typer av centrifugeringsprocesser involverade i separationen av komponenter i en analytblandning. Den viktigaste skillnaden mellan differential- och densitetsgradientcentrifugering är att differentialcentrifugering separerar partiklar i en blandning baserat på partiklarnas storlek medan densitetsgradientcentrifugering separerar partiklar i en blandning baserad på partiklarnas densitet.
