Nyckelskillnaden mellan UV-vis och fluorescensspektroskopi är att UV-synlig spektroskopi mäter absorptionen av ljus i det UV-synliga området, medan fluorescensspektroskopi mäter ljuset som emitteras av ett prov i fluorescensområdet efter att ha absorberat ljus kl. hög energi än den utsända energinivån.
Spektroskopi är en teknik för mätning av absorption och emission av ljus och annan strålning genom materia.
Vad är UV Vis-spektroskopi?
UV synlig spektroskopi är en analytisk teknik som använder absorptionen eller reflektansen av en del av UV-området och kompletta intilliggande synliga områden av det elektromagnetiska spektrumet. Denna teknik finns i två typer; de är absorptionsspektroskopi och reflektansspektroskopi. Den använder ljus i det synliga och intilliggande området.
I allmänhet kan absorptionen eller reflektansen av det synliga ljusområdet direkt påverka den upplevda färgen på kemikalierna som är involverade i processen. På detta område av spektrumet kan vi observera att atomer och molekyler kan genomgå elektroniska övergångar. Här är absorptionsspektroskopi komplementär till fluorescensspektroskopi, där fluorescens handlar om övergångar av elektroner från exciterat tillstånd till grundtillstånd. Dessutom mäter absorption övergångarna från grundtillståndet till det exciterade tillståndet.
Figur 01: UV-synlig spektroskopi
Denna spektroskopiska teknik är användbar för att analysera olika prover kvantitativt, såsom övergångsmetalljoner, starkt konjugerade organiska föreningar och makromolekyler i biologiska system. I allmänhet utförs spektroskopisk analys med lösningar, men vi kan också använda fasta ämnen och gaser.
Vad är fluorescensspektroskopi?
Fluorescensspektroskopi är en typ av elektromagnetisk spektroskopi som är användbar för att analysera fluorescens från ett prov. Denna teknik innebär användning av en ljusstråle (som UV) för att excitera elektroner i molekyler av vissa föreningar, och det kan få dem att avge ljus. Norm alt är denna emission synligt ljus men inte nödvändigtvis densamma.
Figur 02: Fluorescensspektroskopi
Molekyler har vanligtvis olika tillstånd som kallas energinivåer. Denna teknik avser främst elektroniska och vibrationstillstånd. Ofta har analytprovet molekyler i ett jordelektroniskt tillstånd och ett exciterat tillstånd med högre energi. Dessa två elektroniska tillstånd har olika vibrationstillstånd mellan sig. Under fluorescensprocessen exciteras de kemiska arterna genom att absorbera fotoner och flyttas från ett grundtillstånd till en högre energinivå. Därefter orsakar kollisionerna mellan andra molekyler att de exciterade molekylerna förlorar vibrationsenergi tills de kommer till ett lågt vibrationstillstånd från detta exciterade tillstånd. Detta avger fotoner med olika energier och olika frekvenser. Detta kallas fluorescens. Vi kan analysera dessa olika frekvenser som sänds ut på detta sätt för att bestämma de olika vibrationsnivåerna.
Vad är skillnaden mellan UV Vis och fluorescensspektroskopi?
Spektroskopiska tekniker är användbara för att studera egenskaperna hos olika kemiska ämnen. Den viktigaste skillnaden mellan UV-vis och fluorescensspektroskopi är att UV-synlig spektroskopi mäter absorptionen av ljus i det UV-synliga området, medan fluorescensspektroskopi mäter ljuset som emitteras av ett prov i fluorescensområdet efter att ha absorberat ljus med hög energi än det som emitteras energinivå. Dessutom är fluorescensspektroskopi känsligare än UV-synlig spektroskopi.
Infografiken nedan visar skillnaderna mellan UV-vis och fluorescensspektroskopi i tabellform för jämförelse sida vid sida.
Sammanfattning – UV Vis vs fluorescensspektroskopi
Spektroskopi är en viktig analysteknik. Det finns olika typer av spektroskopi, såsom IR-spektroskopi, UV-synlig spektroskopi, fluorescensspektroskopi, etc. Den viktigaste skillnaden mellan UV-vis och fluorescensspektroskopi är att UV-synlig spektroskopi mäter absorptionen av ljus i det UV-synliga området, medan fluorescens spektroskopi mäter ljuset som emitteras av ett prov i fluorescensområdet efter att ha absorberat ljus med hög energi än den emitterade energinivån.