nyckelskillnad – CFU vs MPN
Colony forming unit (CFU) och Most probable number (MPN) är två metoder som används för att räkna upp mikroorganismer i prover. Båda parametrarna används för att detektera vattenkvalitet och fekala indikatorbakterier i vattenprover. Kolonibildande enhet är ett mått som används för att räkna upp antalet livsdugliga bakterieceller eller svampceller i specifik volym eller vikt av ett givet prov. Standardenheten för denna parameter är CFU/ml eller CFU/g. Det mest sannolika antalet är en annan enhet som används för att mäta antalet livsdugliga bakterieceller i ett vätskeprov. Den viktigaste skillnaden mellan CFU och MPN är att CFU beräknas från bakterie- och svampkolonierna som växer på en solid agarplatta medan MPN beräknas från livskraftiga bakterier som växer i ett flytande medium.
Vad är CFU?
Colony forming unit (CFU) är en parameter som mäter antalet livsdugliga bakterie- eller svampceller i ett givet prov. Metoden som räknar kolonibildande enheter hänvisas till som standardplatträkning. De livsdugliga kolonierna som visas på agarplattorna uttrycks som CFU per 1 ml (kolonibildande enhet per milliliter) av provet för vätskor eller CFU per 1 g (kolonibildande enhet per gram) av provet för fasta ämnen.
Det finns två vanliga metoder som används för att mäta CFU i ett prov. De är spridda tallrikmetoden och hällplattmetoden. Dessa två metoder stöds av en teknik som kallas serieutspädning. Serieutspädda prover gör det möjligt att erhålla ett räknebart antal kolonier på agarytan. En känd provvolym kan spridas på ytan av en agarplatta eller blandas med agar och hällas på en platta. Plattan inkuberas sedan och de uppkomna kolonierna räknas. Antalet kolonier relaterar till antalet mikroorganismer i det ursprungliga provet. Plattorna som visar för många kolonier eller för få kolonier utesluts från räkning eftersom resultaten kanske inte är statistiskt korrekta på dessa plattor. Statistiskt sett är det bästa intervallet 30 – 300 kolonier på en agarplatta. Därför bör de korrekta plattorna väljas för korrekt uppräkning. Seriell spädning utförs för ovanstående funktion.
När du räknar antalet livskraftiga kolonier på plattor kan CFU/ml beräknas med följande ekvation.
CFU per ml originalprov=antal kolonier på en platta X spädningsfaktor
Utspädningsfaktor=(1/ Utspädning av plattan)
Om du till exempel får 149 kolonier på plattan med 10-4 utspädningen, kan antalet bakterier i 1 ml av det ursprungliga provet beräknas enligt följande:
CFU/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 eller 1490000
=1. 49 x 106
Figur 01: Colony Forming Unit
Vad är MPN?
Det mest sannolika antalet är ett alternativt mått till CFU/ml. MPN uppskattar också de livsdugliga cellerna i ett vätskeprov. Den räknar organismer som växer i en flytande kultur och är en övervägande bakteriologisk teknik. Denna metod är särskilt användbar för prover som innehåller låga koncentrationer av bakterieceller; till exempel mjölk, dricksvatten etc. MPN-värdet uttrycks för 100 ml volym. MPN förlitar sig på en statistisk metod baserad på sannolikhetsteori. Det finns statistiska tabeller utformade för att hitta MPN-värden per 100 ml av provet. Dessa tabeller visar resultaten vid 95 % konfidensgränser.
MPN-värdet beräknas efter att ha utfört en teknik som kallas för fermenteringsmetod med flera rör. Tre uppsättningar rör som innehåller ett lämpligt odlingsmedium inokuleras med tre olika volymer av provet, såsom 10 ml, 1 ml och 0.1 ml och inkuberades för tillväxt. Efter inkubationsperioden poängsätts rören + (positivt) eller – (negativt) för närvaro eller frånvaro av tillväxt. Mönstret av positiva och negativa resultat jämförs sedan med en MPN-tabell med statistiska sannolikheter för att uppskatta antalet mikroorganismer. Därefter anges MPN-värde för 100 ml av provet. MPN används i stor utsträckning för att detektera koliforma bakterier som finns i vattenprover.
Figur 02: MPN-tabell
Vad är skillnaden mellan CFU och MPN?
CFU vs MPN |
|
| CFU är ett mått som används för att uttrycka antalet livsdugliga bakterie- eller svampkolonier i ett givet prov. | MPN är ett alternativt mått till CFU och mäter antalet livsdugliga bakterieceller i ett flytande prov. |
| Unit | |
| CFU/ml eller CFU/g | MPN/100 ml |
| Kalkyl | |
| CFU beräknas genom att räkna antalet kolonier som odlas på agarplattor. | MPN beräknas genom att jämföra positiva och negativa mönster för rören med MPN-statistisk tabell. |
| Serial Dilution Technique | |
| Serial spädning utförs innan proverna placeras på agarplattor. | Serial utspädning utförs norm alt inte när MPN beräknas |
| Metoder | |
| Bredplåtsmetod och hällplåtsmetoden är två typer av metoder som utförs för att erhålla CFU. | Jäsning med flera rör är metoden som utförs för att erhålla MPN-värde. |
Sammanfattning – CFU vs MPN
Att mäta den mikrobiella tillväxten krävs av många anledningar. I livsmedelsbearbetningsanläggningar är det nödvändigt att mäta nivån och typen av mikroorganismer i livsmedel. Inom livsmedelsindustrin och medicinen är det nödvändigt att säkerställa att steriliseringsbehandlingar tillämpas effektivt. I avloppsreningsverk är det nödvändigt att rutinmässigt ta mikrobiell räkning. Vid optimering av proceduren inom molekylärbiologi krävs det att man mäter antalet kolonier på plattor. Därför finns det olika uppräknings- och tillväxtmätningsmetoder tillgängliga. CFU och MPN är två sådana metoder som används allmänt inom olika områden. CFU är ett mått på antalet livsdugliga bakterie- och svampkolonier som finns i ett givet prov. Den beräknas med standardmetoden för plåträkning eller livskraftig plåträkningsmetod. MPN är ett annat mått som uttrycker antalet bakterieceller som finns i en given volym av vätskeprovet. Den beräknas med jäsningsmetod med flera rör och MPN-tabell. Det här är skillnaden mellan CFU och MPN.
Ladda ned PDF-version av CFU vs MPN
Du kan ladda ner PDF-versionen av den här artikeln och använda den för offlineändamål enligt citat. Ladda ner PDF-versionen här Skillnaden mellan CFU och MPN.
