Den viktigaste skillnaden mellan CLIA och ECLIA är att CLIA använder en kemisk metod för att generera kemiluminescens medan ECLIA använder en elektrokemisk metod för att generera kemiluminescenssignaler i immunanalystekniken.
Immunanalyser används i stor utsträckning vid identifiering och kvantifiering av proteiner associerade med sjukdomar eller infektioner. Därför förlitar de sig i första hand på konceptet antikropp-antigenbindning. Det finns många typer av immunanalyser och kemiluminescerande immunanalyser en sådan framväxande utvecklingsteknik. Både CLIA och ECLIA använder kemiluminescerande indikatorer.
Vad är CLIA?
Cemiluminescent Immunoassay (CLIA) är en typ av immunoassay som använder en självlysande molekyl för detektion. Luminescensen som emitteras av molekylen detekteras på spektrofotometern, vanligtvis vid en våglängd mellan 300 – 800 nm. Kemiluminescensen orsakar excitation av atomerna, och tekniken identifierar exergoniska kemiska reaktioner som den mest lämpliga energikällan för att producera excitation.
CLIA-tekniken sker i två huvudmetoder, direkt CLIA-teknik och indirekt CLIA-teknik. Den direkta CLIA-tekniken använder direkta luminoformarkörer som är bundna till målet, medan den indirekta CLIA-metoden använder enzymatiska markörer. De direkta luminoformarkörerna inkluderar acidum- och ruteniumestrar medan de indirekta markörerna inkluderar alkaliskt fosfatas med adamantyl 1, 2-dioxetan arylfosfat (AMPPD) substrat och pepparrotsperoxidas med luminol eller dess derivat som substrat.
Figur 01: Kemiluminescens
De viktigaste fördelarna med CLIA är det breda dynamiska utbudet av funktionalitet, hög intensitet i signalleverans, frånvaro av bakgrundsinterferens, hög specificitet, snabbhet, stabilitet och kompatibilitet med olika analysprotokoll. Däremot är deras höga kostnad och begränsningar vad gäller antigendetektering och testpaneler nackdelarna med CLIA.
Vad är ECLIA?
Electrochemiluminescence Immunoassay (ELCIA) är en ny teknik för immunanalysutveckling som använder konceptet elektrokemiluminescens. I begreppet elektroluminescens genereras mellanprodukterna elektrokemiskt. Dessa elektroniskt genererade mellanprodukter når sedan ett exciterat tillstånd och resulterar i emission av ljus. Våglängden i vilken ljuset sänds ut motsvarar energigapet. Kemiluminescens produceras sålunda på grund av att en eller flera reaktanter produceras elektrokemiskt på elektroden.
ECLIA är en användbar analytisk applikation med hög känslighet och specificitet. Det används främst för att identifiera proteiner relaterade till olika patologiska och medicinska tillstånd. Dess viktigaste fördelar inkluderar bredare dynamiskt område, mångsidighet, rumslig och tidsmässig kontroll genom att applicera elektrodpotentialer, hög känslighet upp till pikomolära områden. Men det faktum att det kräver experthantering och de höga kostnaderna är dess nackdelar.
Vilka är likheterna mellan CLIA och ECLIA?
- Båda teknikerna bygger på konceptet antigen-antikroppsbindning.
- Dessutom används båda huvudsakligen för sjukdomsdiagnostik baserad på proteinkvantifiering.
- Båda är känsliga och specifika kitmetoder.
- De använder konceptet kemiluminescens för detektion.
- De kan automatiseras.
- Båda kräver en spektrofotometer för detektion.
- Båda har ett brett dynamiskt omfång.
- De är kostsamma tekniker.
Vad är skillnaden mellan CLIA och ECLIA?
CLIA är en immunanalysteknik som använder teorin om kemiluminescens, medan ECLIA är en teknik för immunanalys som använder teorin om elektrokemi i kombination med kemiluminescens. Så detta är den viktigaste skillnaden mellan CLIA och ECLIA. Därför använder CLIA kemiska reaktioner som leder till utveckling av kemiluminescerande signaler, medan ECLIA använder elektrokemiska reaktioner som leder till utveckling av kemiluminescerande signaler.
Infografiken nedan över skillnaden mellan CLIA och ECLIA visar fler jämförelser mellan båda teknikerna.
Sammanfattning – CLIA vs ECLIA
CLIA och ECLIA är båda tekniker som spelar en viktig roll i sjukdomsdiagnostik. De är avancerade metoder för immundiagnostik baserade på konceptet antikropp-antigenbindning. Den viktigaste skillnaden mellan CLIA och ECLIA är metoden för att generera kemiluminescens. Medan CLIA använder kemiska reaktioner för att generera kemiluminescens efter antikropp-antigenbindning, använder ECLIA elektrokemiska reaktioner för att generera kemiluminescens. Båda teknikerna är dock snabba och specifika.
