Nyckelskillnaden mellan Bradford- och Lowry-proteinanalysen är att Bradford-proteinanalysen är baserad på absorbansförskjutningen av färgämnet Coomassie brilliant blue G-250 medan Lowry-proteinanalysen är baserad på reaktionen av kopparjoner (Cu+) joner produceras genom oxidation av peptidbindningar med Folin–Cioc alteu-reagens.
En analys är en analysteknik som hjälper till att karakterisera de viktigaste funktionella komponenterna i ett prov. Därför kan en analys vara antingen ett kvalitativt eller kvantitativt test. Många områden inklusive laboratoriemedicin, farmakologi, miljöbiologi, molekylärbiologi, biokemi och immunologi använder denna typ av analyser rutinmässigt. Bradford och Lowry proteinanalys är två biokemiska analyser som bestämmer proteinkoncentrationen i en provlösning. Båda analyserna använder kolorimetriska tekniker för att ge resultat.
Vad är Bradford Protein Assay?
Bradford proteinanalys är en snabb spektroskopisk analytisk procedur för proteinanalys. Den visar hög noggrannhet när man mäter proteinkoncentrationen i en lösning. Marion Bradford introducerade denna procedur 1976. I denna analys är den totala reaktionen baserad på aminosyrasammansättningen av de uppmätta proteinerna. Med andra termer är Bradford-proteinanalysen en kolorimetrisk analys. Den använder färgen Coomassie brilliant blue. Följaktligen beror denna kolorimetriska proteinanalys på färgämnets absorbansförskjutning. Coomassie brilliant blue G-250 finns i tre format: katjonisk (röd), anjonisk (blå) och neutral (grön). Under sura förhållanden omvandlas den röda formen av färgämnet till blått. Det bekräftar bindningen av proteinet. Om proteinet inte är närvarande kan lösningen förbli i brun färg.
Figur 01: Bradford-proteinanalys
Bradford proteinanalys skiljer sig från andra proteinanalyser eftersom den är mindre mottaglig för störningar av olika kemiska föreningar som finns i proteinlösningen. Dessa föreningar inkluderar natrium, kalium, glukos och sackaros, etc.
Vad är Lowry Protein Assay?
Lowry proteinanalys är en biokemisk analys som används för att bestämma den totala nivån av protein i en lösning. Oliver H. Lowry är den person som utvecklade detta reagens 1940. Proceduren skildrar lösningens totala proteinkoncentration genom en färgförändring som är proportionell mot proteinkoncentrationen i lösningen. Därför är detta också en kolorimetrisk proteinanalys.
Reaktionen mellan kopparjoner (Cu+) som produceras genom oxidation av peptidbindningar och Folin-Cioc alteu-reagens är grunden för denna procedur. Detta reagens innehåller också fosfomolybdensyra och fosforvolframsyra. Reaktionsmekanismen för Lowry-proteinanalysen är dock inte väl förstått. Men det involverar oxidation av cystein-, tryptofan- och tyrosinrester genom reduktion av Folin-Cioc alteu-reagens.
Figur 02: Lowry-proteinanalys
Cysteinresterna bidrar till absorbansen som observeras i Lowry-proteinanalysen och reaktionen resulterar i en lysande blå molekyl; heteropoly molybdenblått. Reduktionen av denna molekyl mäts genom absorbans vid 660 nm. Koncentrationen av cystein- och tryptofanrester som reducerade Folin-Cioc alteu-reagenset härleder därför den totala koncentrationen av proteinet i lösningen.
Vilka är likheterna mellan Bradford och Lowry Protein Assay?
- Bradford och Lowry proteinanalyser bestämmer proteinkoncentrationen i en lösning.
- Båda metoderna är kolorimetriska metoder.
- De båda metodernas känslighet är dessutom hög.
Vad är skillnaden mellan Bradford och Lowry Protein Assay?
Bradford och Lowry proteinanalys är två typer av analyser som bestämmer proteinkoncentrationen i en lösning. Bradford-proteinanalysen bygger på absorbansförskjutningen av färgämnet Coomassie brilliant blue G-250 medan Lowry-proteinanalysen beror på reaktionen av kopparjoner som produceras genom oxidation av peptidbindningar, med Folin-Cioc alteu-reagens. Så detta är nyckelskillnaden mellan Bradford och Lowry proteinanalys. Bradford proteinanalys tar 15 minuter att producera ett resultat medan Lowery proteinanalys tar 40-60 minuter att producera ett resultat. Således är detta en annan skillnad mellan Bradford och Lowry proteinanalys. Dessutom är Bradford-proteinanalysen beroende av aminosyrasammansättningen medan Lowry-proteinanalysen delvis är beroende av aminosyrasammansättningen. Därför är detta också en skillnad mellan Bradford och Lowry proteinanalys.
Below inforaphic ger mer information om skillnaden mellan Bradford och Lowry proteinanalys.
Sammanfattning – Bradford vs Lowry Protein Assay
En analys är en analysteknik som används för att karakterisera den huvudsakliga funktionella komponenten i ett prov. Bradford och Lowry proteinanalys är två typer av proteinanalyser som fungerar under kolorimetriska tekniker. Både Bradford och Lowry proteinanalyser bestämmer proteinkoncentrationen i en lösning. Men den viktigaste skillnaden mellan Bradford och Lowry Protein Assay ligger på den kolorimetriska tekniken de använder. Bradford-proteinanalysen använder Coomassie brilliant blue G-250 medan Lowry-proteinanalysen använder kopparjoner (Cu+)-joner och Folin-Cioc alteu-reagens. Dessutom ger Bradford-metoden snabba resultat än Lowry-proteinanalysen. Båda metoderna är dock mycket känsliga och utsätts för störningar från olika ämnen.
