nyckelskillnad – RPMI vs DMEM
De flesta forskningsstudier involverar djurcellsodling och därför kräver dessa studier underhåll av djurcellinjer under speciella tillväxtförhållanden. Djurcellsodling utförs i stor utsträckning i farmakologiska studier för att identifiera läkemedelsmetabolism, i sjukdomsdiagnostik och i cancerforskning. Cellodlingsmediet är en viktig aspekt av djurcellsodling. Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) och Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) är två odlingsmedier som används i djurcellsodling. RPMI är ett medium som används allmänt för att odla däggdjursceller i suspensionskultur. DMEM är en modifierad typ av bas alt medium, med ökade aminosyra- och vitaminkoncentrationer upp till fyra gånger. DMEM används för att odla celler i vidhäftande kulturer. Den viktigaste skillnaden mellan de två medierna är typen av medias kultur. RPMI används på suspensionskulturer, medan DMEM används för att odla vidhäftande celler.
Vad är RPMI?
RPMI eller Roswell Park Memorial Institute Medium kallas också RPMI 1640. Medians namn härleddes av institutet där media upptäcktes. Detta medium används vanligtvis i djurcellsodling, speciellt för tillväxt av däggdjursceller. De utvecklades ursprungligen för att odla mänskliga lymfocyter.
Följande ingredienser ingår i RPMI.
- Glucose
- pH-indikator (fenolröd)\
- S alter (natriumklorid, natriumbikarbonat, dinatriumfosfat, kaliumklorid, magnesiumsulfat och kalciumnitrat)
- Aminosyror
- Vitaminer (i-inositol, kolinklorid, para-aminobensoesyra, folsyra, nikotinamid, pyridoxinhydroklorid, tiaminhydroklorid, kalciumpantotenat, biotin och riboflavin, cyanokobalamin)
Det speciella med RPMI är den ökade koncentrationen av fosfat i mediet. RPMI används i en 5% koldioxidatmosfär. Detta kommer att ge maximala och optimala förutsättningar för celltillväxt. Mediets pH hålls vid 8,0 av bikarbonatbuffertsystemet.
Figur 01: Cellkultur på en petriskål
Applikationer av RPMI i cellodling
- Odling av humana T- och B-lymfocyter, benmärgsceller och hybridom.
- Används för att studera mänskliga neoplastiska celler.
Vad är DMEM?
Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) är ett modifierat medium som är kommersiellt framställt. Den ursprungliga konsistensen på mediumpulvret är gul. I DMEM ökas vitaminkoncentrationen upp till fyra gånger och ökar därmed näringsinnehållet i mediet.
DMEM modifieras också genom att lägga till fler s alter som järnnitrat, natriumpyruvat och några icke-essentiella aminosyror som serin och glycin. Sammansättningen av glukos i mediet förändras också. Den ursprungliga formuleringen består av 1000 mg/L glukos, medan koncentrationen i DMEM ökar upp till 4500 mg/L. DMEM kräver också tillskott av ett serummedium eftersom det inte är ett komplett medium. Oftast kompletteras DMEM med Fetal Bovine Serum (FBS). FBS tillhandahåller de proteiner och tillväxtfaktorer som krävs för odlingsprocessen.
Mediets pH varierar vid tillsats av natriumbikarbonat. pH i mediet innan natriumbikarbonat tillsätts är runt 6,80 – 7,40, medan pH efter tillsats av natriumbikarbonat ligger i intervallet 7,60 – 8,20. Mediets lagringstemperatur är 2 – 8 0C.
Figur 02: DMEM
Applications of DMEM
- Att studera den plackbildande förmågan hos polyomviruset i musembryonala celler.
- I studier av kontakthämning.
- I forskning och analys av kycklingcellskulturer.
Vilka är likheterna mellan RPMI och DMEM?
- Både RPMI och DMEM används i djurcellsodling.
- Både RPMI- och DMEM-media är flytande formuleringar.
- Både RPMI- och DMEM-media innehåller de essentiella aminosyrorna, vitaminerna och oorganiska s alterna som krävs för tillväxt.
- Både RPMI- och DMEM-media är ofullständiga. Därför bör serum tillsättas.
- Både RPMI- och DMEM-media använder glukos som sin kolkälla.
- Både RPMI- och DMEM-media har ett högre pH.
Vad är skillnaden mellan RPMI och DMEM?
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI är ett medium som används allmänt för att odla däggdjursceller i en suspensionskultur. | DMEM är en modifierad typ av basalmedium med ökade aminosyra- och vitaminkoncentrationer. |
| Närvaro av extra fosfater | |
| Närvarande i RPMI. | Frånvarande i DMEM. |
| Använd | |
|
Används för att odla celler i vidhäftande kulturer. Den är van vid
|
| Types of Culture | |
| RPMI används för suspensionskulturer. | DMEM används för kulturer med cellvidhäftning. |
Sammanfattning – RPMI vs DMEM
Både RPMI och DMEM används i stor utsträckning i djurcellsodling, speciellt för att odla djurcellinjer inklusive lymfocyter in vitro. DMEM är ett modifierat basmedium där det finns en ökad näringskoncentration. RPMI utvecklat av Roswell Park Memorial Institute, och det är också ett medium som används i djurcellsodling speciellt för däggdjurslymfocyter. Båda medierna är kommersiellt tillgängliga. Det här är skillnaden mellan RPMI och DMEM.
