nyckelskillnad – primär cellkultur vs celllinje
Forskningsområdet har tagit en stor vändning med införandet av cellodling och användningen av cellinjer för forskning. Olika tester görs på artificiellt preparerade celler och cellinjer för att bedöma cellens beteende. Mest mänskligt baserad forskning kräver cellodling och cellinjer för att validera resultaten, särskilt när forskningsstudierna är baserade på farmakologi och läkemedelsupptäckt. Primär cellkultur är en kultur framställd genom direkt isolering av celler via mekaniska eller enzymatiska metoder. En cellinje framställs genom att kontinuerligt passera en primär cellkultur för att erhålla en cellinje som har förvärvat homologa karaktärer. Den viktigaste skillnaden mellan den primära cellkulturen och cellinjen är antalet passagetider var och en av dem har. Den primära cellkulturen isoleras direkt medan en cellinje framställs genom att passera en primär cellkultur flera gånger.
Vad är en primärcellskultur?
Primär cellkultur är ett cellodlingspreparat genom att isolera celler direkt från källan via mekaniska eller enzymatiska metoder. Cellerna isoleras genom trypsinisering eller icke-trypsiniseringsmetoder. De primära cellkulturerna odlas i lämpliga tillväxtmedier som innehåller tillväxtfaktorer, hormoner, lipider och andra odefinierade komponenter. Vissa medier måste åtföljas av serum. Medierna säkerställer att förutsättningarna för tillväxt är optimerade, och cellerna överlever vid optimala förhållanden. Celler kan isoleras från olika vävnadskällor såsom levervävnad, endotel och nervvävnad hos människor eller högre djur via trypsinisering.
Vid isolering av celler från växter och mikroorganismer används speciella extraktionsförfaranden som använder både mekaniska och kemiska metoder. Dessa isolerade celler kan immobiliseras på ett fast underlag eller kan passeras i flera generationer för att utvecklas till en cellinje.
Primära cellkulturer är huvudsakligen av två typer; Vidhäftande cellkulturer och suspensionscellkulturer. Vidhäftande primära cellkulturer är förankringsberoende och de kräver fast stöd för tillväxten. De vidhäftande primära cellkulturerna härrör huvudsakligen från vävnader eller organ. Suspensionens primära cellkulturer är förankringsoberoende och de växer i flytande media. Suspensionskulturerna ska omröras kontinuerligt under tillväxtfasen. Suspensionens primära cellkulturer kan härledas direkt från blod.
Primära cellkulturer har en relativt kortare livslängd, men informationen som härrör från primära cellkulturer under in vitro-förhållanden utgör grunden för många studier. De är användbara för att studera cellens egenskaper, både morfologiskt och kemiskt beteende.
Vad är en mobillinje?
Celllinjer används i stor utsträckning inom forskning och för närvarande är cellinjer såsom cancercellinjer, levercellinjer och njurcellinjer kommersiellt tillgängliga för forskningsändamål. Cellinjerna framställs genom kontinuerlig passage av primär cellkultur. Passage avser subodlingsprocessen där cellkulturerna utvecklas till en cellinje. Dessa cellinjer är kulturer i en tvådimensionell eller tredimensionell matris och bibehålls som cellinjer.
Celllinjer klassificeras som ändliga och kontinuerliga cellinjer. Finita cellinjer utsätts för ett bestämt antal passager (20 – 30 passager). Efter fullbordandet av det erforderliga antalet passager går cellinjen in i ett åldrande stadium. Dessa celler är lätta att hantera eftersom deras tillväxt är bestämd. De kontinuerliga cellinjerna kallas också odödliga cellinjer. Dessa cellinjer har inte ett bestämt antal passager. De växer i det oändliga och kan således förvärva mutationer. Därför är kontinuerliga cellinjer lätt muterade och därför förändras de i sina morfologiska och genetiska egenskaper, till skillnad från ändliga cellinjer.
Figur 01: Celllinje
Celllinjer används eftersom det är bekvämare än att använda en primär cellkultur eftersom den kan användas om och om igen under en viss period. Men den är mer benägen för mutationer och kontaminationer när deras spridning ökar.
Vilka är likheterna mellan primär cellkultur och cellinje?
- Både cellkultur- och cellinjetyperna av celler används i forskning för att studera morfologiska, kemiska och genetiska egenskaper hos en cell.
- Både cellkultur- och cellinjetyper av celler extraheras med mekaniska och enzymatiska metoder.
- Både cellkultur- och cellinjetyperna kräver tillväxtmedia och specifika tillväxtförhållanden.
- Både cellkultur- och cellinjetyper av celler är benägna att mutera.
Vad är skillnaden mellan primär cellkultur och cellinje?
Primär cellkultur vs celllinje |
|
| En primär cellkultur är en kultur framställd genom direkt isolering av celler med mekaniska eller enzymatiska metoder. | En cellinje prepareras genom att kontinuerligt passera en primär cellkultur för att erhålla en cellinje som har förvärvat homologa karaktärer. |
| Antal passager | |
| Primära cellkulturer passeras inte, cellerna upprätthålls under odlingsförhållanden. | Celler passeras definitivt eller på obestämd tid vid tillverkning av cellinjer. |
| Typer | |
| Adherent primär cellkultur och Suspension primär cellkultur är två typer av primära cellkulturer. | Finit cellinje och kontinuerlig cellinje är två typer av cellinjer. |
| Livslängd | |
| Primära cellkulturer har en kort livslängd. | Celllinjer har en längre livslängd. |
Sammanfattning – Primär cellkultur vs celllinje
Primära cellkulturer och cellinjer används i stor utsträckning i forskning för att studera beteendemönster hos olika celler under olika förhållanden och under olika farmakologiska aspekter. Primära cellkulturer isoleras direkt från källorganet eller vävnaden och odlas på ett odlingsmedium. Förhållandena är optimerade för tillväxten av de specifika cellerna. Cellinjer, däremot, framställs genom att de primära cellkulturerna passerar ett ändligt eller ett oändligt antal gånger. Celllinjer är kommersiellt tillgängliga och är populära bland forskare på grund av den enkla användningen.
