Nyckelskillnaden mellan DNA- och RNA-isolering är att DNA-isolering är en procedur där en typ av nukleinsyra som kallas DNA extraheras från en biologisk cell, medan RNA-isolering är en procedur där en typ av nukleinsyra som kallas RNA är extraherad från en biologisk cell.
Nukleinsyraisolering är utgångspunkten i ett stort antal nedströmsapplikationer. Den höga kvaliteten på nukleinsyror i startproverna är en nyckelfaktor för framgången för efterföljande nedströmsapplikationer. Nukleinsyraisolering skulle kunna definieras som en serie steg för att erhålla nukleinsyra i ett renhetsprov som kan användas för olika nedströmsapplikationssteg. Syftet med nukleinsyraextraktion är att sönderdela cellmembranet och uppnå maximal eliminering av lipider och proteiner för att erhålla rena nukleinsyror såsom DNA eller RNA.
Vad är DNA-isolering?
DNA-isolering är en rutinprocedur där en typ av nukleinsyra som kallas DNA extraheras från en biologisk cell. DNA-isolering utförs genom att extrahera DNA från blod, frusna vävnadsprover och paraffinvävnadsblock. Det finns tre huvudsteg i DNA-isolering, inklusive celllys, extrahering av DNA och utfällning. Vid cellys separeras cellerna i ett prov från varandra, ofta med fysiska metoder som malning eller vortexning och sätts i en lösning som innehåller s alt. Vanligtvis hjälper de positivt laddade natriumjonerna i s altet till att skydda de negativt laddade fosfatgrupperna som löper längs DNA:ts ryggrad. Senare tillsätts ett rengöringsmedel för att bryta ner lipiderna i cellmembranet och cellkärnorna, som frisätter DNA när dessa membran störs.
Figur 01: DNA-isolering
DNA-extraktion utförs för att få ett rent DNA-prov. Ofta tillsätts ett proteasenzym för att bryta ned DNA-associerade proteiner och andra cellulära proteiner. Dessutom kan en del av det cellulära skräpet tas bort genom att filtrera provet. Slutligen fälls DNA ut genom att använda alkohol. Dessutom, om det finns mycket DNA, kan en snål vit fällning observeras i slutet av proceduren.
Vad är RNA-isolering?
RNA-isolering är en procedur där en typ av nukleinsyra som kallas RNA extraheras från en biologisk cell. Denna procedur kompliceras ofta av närvaron av ribonukleasenzymer i celler och vävnader som bryter ned RNA. Flera metoder används inom molekylärbiologin för att isolera RNA från prover, såsom guanidinium-tiocyanat-fenol-kloroformextraktion.
Figur 02: RNA-isolering
RNA-isolering består vanligtvis av flera steg, inklusive cellys och homogenisering, släckning av biokemiska processer, nukleinsyrafördelning, RNA-hämtning, rårening och bedömning av kvaliteten på RNA. Den filterpappersbaserade lys- och elueringsmetoden har en hög genomströmningskapacitet vid RNA-extraktion. Dessutom är RNA-extraktion i flytande kväve genom att använda en mortel och mortelstöt också en mycket användbar metod eftersom den förhindrar ribonukleasaktivitet.
Vilka är likheterna mellan DNA- och RNA-isolering?
- DNA- och RNA-isolering är två typer av nukleinsyraisoleringsförfaranden.
- Båda procedurerna har liknande grundläggande steg, såsom celllys, extraktion och rening.
- Dessa procedurer isolerar viktiga nukleinsyratyper som har ett antal nedströmsapplikationer.
- De utförs i laboratorieinställningar.
- De kan utföras med tillverkade kit.
Vad är skillnaden mellan DNA- och RNA-isolering?
I DNA-isolering extraheras en typ av nukleinsyra som kallas DNA från en biologisk cell, medan vid RNA-isolering extraheras en typ av nukleinsyra som kallas RNA från en biologisk cell. Detta är alltså nyckelskillnaden mellan DNA- och RNA-isolering. Dessutom utförs DNA-isoleringen norm alt vid cirka pH 7 till 8 medan RNA-isolering norm alt utförs vid cirka pH 4,5.
Infografiken nedan visar skillnaderna mellan DNA- och RNA-isolering i tabellform för jämförelse sida vid sida.
Sammanfattning – DNA vs RNA-isolering
DNA- och RNA-isolering är två typer av nukleinsyraisoleringsprocedurer. DNA-isolering är en procedur under vilken DNA extraheras från en biologisk cell. RNA-isolering är en procedur under vilken RNA extraheras från en biologisk cell. Så detta är den viktigaste skillnaden mellan DNA- och RNA-isolering.
