Nyckelskillnaden mellan radioimmunoanalys och immunradiometrisk analys är att i radioimmunoanalys kombineras provet eller föreningen som ska mätas med ett radioaktivt antigen före kombinationen, medan i den immunradiometriska analysen kombineras provet eller föreningen omedelbart med det radioaktivt märkta antikroppar.
En immunanalys är ett biokemiskt test som detekterar närvaron eller koncentrationen av makromolekyler i en lösning som använder en antikropp eller antigen. Fluorescerande och radioaktiva antikroppar används för att mäta antigener i ett prov. Initi alt användes antikroppar i utfällningstekniker såsom immunutfällning, immundiffusion och immunelektrofores för serumproteinanalys. För närvarande används mycket känsliga tekniker som radioimmunoanalys och immunradiometriska analyser för mätning av läkemedel, tumörmarkörer och hormoner.
Vad är Radioimmunoassay Assay?
Radioimmunoassay (RIA) är en immunanalys som använder radioaktiva ämnen stegvis bildning av antigen-antikroppskomplex. RIA använder vanligtvis radioaktiva antikroppar för att detektera mängden antigen i ett prov. RIA är en mycket specifik och mycket känslig in vitro-analys. Principen bakom RIA är konkurrensbindande. Här tävlar ett radioaktivt antigen mot ett icke-radioaktivt antigen om en konstant mängd antikroppar eller receptorbindningsställen. RIA kräver speciell licensiering och försiktighetsåtgärder eftersom radioaktiva ämnen används, och det är fortfarande en av de billigaste teknikerna.
Figur 01: Immunoassay
Under RIA görs en känd mängd antigen ofta radioaktivt genom att märka det med gamma-radioaktiva isotoper av jod kopplat till tyrosin. Sedan kombineras detta antigen med en känd mängd antikropp. Här binder både antigen och antikropp specifikt till varandra. Sedan tillsätts ett blodserumprov för att initiera en kompetitiv reaktion mellan de märkta antigenerna och omärkta antigener i serumet med specifika antikroppar. I denna reaktion frigör antikroppar en viss mängd märkt antigen. Denna kvantitet är proportionell mot förhållandet mellan märkt och omärkt antigen. Slutligen genereras en bindningskurva för att härleda mängden antigen i en patients blodserum.
Vad är immunradiometrisk analys?
Immunoradiometrisk analys (IRMA) är en immunanalys som använder radioaktivt märkta antikroppar. I IRMA märks antikropparna med hjälp av radioisotoper. Dessa antikroppar binder till antigenerna som finns i ett specifikt prov. I ett positivt prov binder antikroppar som är radioaktivt märkta till antigeners fria epitop. Detta bildar ett antigen-antikroppskomplex.
Under den andra reaktionen avlägsnas de märkta antikropparna som är obundna med hjälp av ett fastfasantigen. Det återstående antalet radioaktiva antikroppar i lösningen är en direkt funktion av antigenkoncentrationen. IRMA är känt som en överskottsreagensanalys där en överskottsmängd radiomärkt antikropp används som reagens. Här tillåts en överskottskoncentration av märkt antikropp eller antigen att reagera. Som det sista steget separeras de antigenbundna och fria antikropparna, och den antigenbundna fraktionen utsätts för radioaktiva analyser. Här är fraktionens aktivitet direkt proportionell mot koncentrationen av antigenet.
Vilka är likheterna mellan radioimmunoanalys och immunradiometrisk analys?
- Både radioimmunoanalys och immunradiometrisk analys är immunanalyser som använder radioaktiva ämnen i den stegvisa bildningen av antigen-antikroppskomplex.
- De bildar ett antigen-antikroppskomplex.
Vad är skillnaden mellan radioimmunoanalys och immunradiometrisk analys?
Radioimmunoanalys är en immunanalys som bestämmer antikroppsnivåer av ett antigen märkt med en radioisotop medan immunradiometrisk analys är en överskottsreagensanalys som använder en överskottskoncentration av radiomärkt antikropp. Således är detta nyckelskillnaden mellan radioimmunoanalys och immunradiometrisk analys. IRMA kan ge högre känslighet än RIA. I RIA är antigener märkta med gamma-radioaktiva isotoper av jod medan antikroppar i IRMA är märkta med isotoper av jod. Så detta är också en skillnad mellan radioimmunoanalys och immunradiometrisk analys. Eftersom IRMA är en överskottsreagensteknik, utförs analysen på kortare tid än RIA.
Följande tabell sammanfattar skillnaderna mellan radioimmunoanalys och immunradiometrisk analys.
Sammanfattning – Radioimmunoanalys vs immunradiometrisk analys
Radioimmunoassay är en immunanalys som använder radioaktiva ämnen i stegvis bildning för att bestämma antikroppsnivåer. RIA använder vanligtvis radioaktiva antikroppar. Ett radioaktivt antigen tävlar mot ett icke-radioaktivt antigen om en konstant mängd antikroppar eller receptorbindningsställen. Den immunradiometriska analysen är en immunanalys som utförs för att bestämma antigennivåer i ett prov med användning av radiomärkta antikroppar. Dessa antikroppar binder till antigener som finns i ett specifikt prov. I slutet av varje analys bildas ett antigen-antikroppskomplex. För att erhålla resultaten av analyserna ritas en bindningskurva. I radioimmunoanalys är den märkta antigenmängden proportionell mot förhållandet mellan märkt och omärkt antigen, men i en immunradiometrisk analys är aktiviteten hos den antigenbundna fraktionen direkt proportionell mot koncentrationen av antigenet. Detta är sammanfattningen av skillnaden mellan radioimmunoanalys och immunradiometrisk analys.
