Nyckelskillnaden mellan elektroporering och mikroinjektion är att elektroporering är en teknik som använder en elektrisk högspänningspuls för att leverera DNA till värdceller medan mikroinjektion är en teknik som använder en finspets glasnål eller mikropipett för att leverera DNA till värdceller.
Transformation är den process genom vilken främmande DNA överförs till värdceller. Genom transformation kan den genetiska sammansättningen av organismen förändras. Det finns olika kemiska, biologiska och fysikaliska omvandlingsmetoder. Vissa är direkta metoder, medan vissa är indirekta metoder. Elektroporering och mikroinjektion är två fysiska metoder som är direkta transformationsmetoder. Elektroporation använder ett elektriskt fält för att inducera mikroskopiska porer i biologiska cellmembran för att införliva DNA i värdceller. Mikroinjektion, å andra sidan, levererar DNA direkt med hjälp av en mikropipett eller en glasnål med fin spets.
Vad är elektroporation?
Elektroporation är en transformationsteknik som levererar DNA till växtceller och protoplaster. Denna teknik använder en elektrisk högspänningspuls. Växtmaterial inkuberas i en buffertlösning med DNA. Därefter utsätts lösningen för en elektrisk högspänningspuls. Högspänningsinducerade porer skapas i växtcellmembran, och genom dessa porer migrerar DNA inuti cellerna och integreras med växtgenomiskt DNA. Effektiviteten av denna metod beror på växtmaterial och behandlingsförhållanden.
Figur 01: Elektroporation
När transformationen görs med hjälp av elektroporering, får endast 40 till 50 % av cellerna DNA. Dessutom kan endast 50 % av de transformerade cellerna överleva under denna metod. Denna metod är dock lätt att utföra och förändrar inte den biologiska strukturen eller funktionen hos celler. Dessutom kan den användas för ett brett spektrum av celler.
Vad är mikroinjektion?
Mikroinjektion är en transformationsteknik som är särskilt användbar vid införande av DNA i stora celler. Denna metod använder en glasnål med fin spets eller en mikropipett för att leverera DNA till växtprotoplaster eller djurceller (oocyter, ägg och embryon). Faktum är att denna metod är mer lämpad för att göra transgena djur som möss. I denna metod inkorporeras DNA direkt i kärnan eller cytoplasman.
I likhet med elektroporering är mikroinjektion en direkt transformationsteknik. Mikroinjektion utförs under en specialiserad mikroskopuppställning. Datoriserad kontroll av att hålla pipett, nål, mikroskop scen och videoteknik har ökat effektiviteten av denna teknik. Vid injicering av DNA kan ett färgämne användas för att enkelt identifiera transformerade celler. Därför finns det inget behov av att använda en separat metod för att identifiera transformerade celler. Det viktigaste är att mikroinjektionsproceduren inte kräver en markörgen.
Figur 02: Mikroinjektion
Dessutom är den här metoden mycket effektiv och reproducerbar. Denna metod är dock kostsam, tidskrävande och kräver kunnig personal. Dessutom kan endast ett litet antal celler behandlas med denna metod.
Vilka är likheterna mellan elektroporering och mikroinjektion?
- Både elektroporering och mikroinjektion är två typer av transformationstekniker.
- Dessa metoder levererar DNA till växtceller och protoplaster.
- De är direkta metoder.
- Dessutom är de fysiska eller mekaniska metoder.
- Båda metoderna är användbara när man producerar transgena växter och djur.
Vad är skillnaden mellan elektroporering och mikroinjektion?
Elektroporationsteknik använder ett elektriskt fält för att introducera DNA medan mikroinjektionsteknik är en mikropipett eller en finspetsad glasnål för att introducera DNA. Detta är alltså nyckelskillnaden mellan elektroporering och mikroinjektion. Dessutom används elektroporering mest för växtceller och protoplaster medan mikroinjektion mest används för djurceller. Dessutom är elektroporering inte lika tidskrävande som mikroinjektion.
Infografiken nedan sammanfattar skillnaderna mellan elektroporering och mikroinjektion i tabellform.
Sammanfattning – Elektroporation vs Microinjection
Elektroporation och mikroinjektion är två fysiska metoder för genöverföring. Elektroporering använder ett elektriskt högspänningsfält medan mikroinjektion använder en glasnål eller mikropipett. Detta är alltså nyckelskillnaden mellan elektroporering och mikroinjektion. Båda metoderna introducerar dock exogent DNA direkt i värdceller.
