Eluent vs Eluate
Kromatografi är en mycket använd metod för att separera komponenter från en blandning. Denna metod använder en stationär fas och en mobil fas. Komponenter i en blandning förs genom den stationära fasen av flödet av mobil fas. Vid kromatografi baseras separationer på skillnader i migrationshastigheter mellan komponenterna i den mobila fasen. I en packad kolonn löses komponenterna upp genom eluering. Kolonnen består av ett sm alt rör, som är packat med en fast substans som håller fast den stationära fasen. Fastämnet i sig kan vara den stationära fasen. Ibland används ett inert fast ämne, som håller den stationära fasen. Mobil fas kan införas från toppen av röret, och den kommer då att uppta utrymmena mellan de stationära faserna. Inledningsvis laddas lösningsblandningen innehållande komponenterna som behöver lösas i kolonnen. För lastningen kan en del av mobil fas användas. Beroende på polariteterna kommer komponenterna i blandningen att fördela sig mellan stationär fas och mobil fas. Eluering sker sedan genom att provkomponenterna tvingas genom kolonnen genom att kontinuerligt tillsätta färsk mobil fas. Då och då kunde komponenterna som kommer ut ur kolonnen samlas upp i provrör. Som den mobila fasen kan vi använda lösningsmedelsblandningar beroende på vilka komponenter vi behöver separera. Genom att använda en serie lösningsmedel enligt en polaritetsgradient kan vi separera alla komponenter individuellt. Förutom den ovan förklarade vätskekromatografimetoden kan vi också använda gaskromatografi för att separera gasformiga prover. I detta fall är den mobila fasen en gas, som är känd som bärgasen.
Eluent
Eluent är den del av den mobila fasen som bär provkomponenterna med sig. Vid vätskekromatografi är eluenten lösningsmedlet som används som den mobila fasen. Vid gaskromatografi är det bärgasen. Vanligtvis är elueringsgasen i gaskromatografi en inert/oreaktiv gas som helium eller kväve. Eluenten rör sig nedåt i kolumnen som innehåller provet. Eftersom eluenten och den stationära fasen har motsatta polariteter, interagerar eluenten inte med den stationära fasen. Därför är dess rörelse oberoende. Om komponenterna i provet har en liknande polaritet som elueringsmedlet har de hög affinitet till varandra. Detta underlättar provets rörelse.
Eluate
Eluate är det som kommer ut ur kolumnen. Vanligtvis innehåller denna mobil fas och analyterna från provet, som vi ville separera. Genom att ändra typen av eluent som vi lägger till får vi eluat som innehåller olika komponenter i provet. Genom att sedan ta bort den mobila fasen (genom avdunstning) kan vi isolera de individuella analyterna som fanns i provet.
Vad är skillnaden mellan Eluent och Eluate?
• Eluent är den del av den mobila fasen som bär provkomponenterna med sig. Eluat är kombinationen av den mobila fasen och analyterna. Därför är eluate vad vi är intresserade av.
• Vi lägger till eluent i kolonnen, och eluate är det som kommer ut ur kolonnen.
• Vi kan bestämma och kontrollera vad vi lägger till som eluent, men eluatets natur är beroende av eluenten. Vi kan inte kontrollera dess beståndsdelar till 100%.
