Nyckelskillnaden mellan kinetisk och slutpunktsreaktion är att i kinetisk reaktionsmetod mäter vi skillnaden i absorbans mellan två punkter under reaktionens fortskridande, medan vi i slutpunktsreaktionsmetoden mäter den totala mängden av analyter som deltar i reaktionen.
Den kinetiska reaktionsmetoden och slutpunktsreaktionsmetoden är användbara vid enzymanalys. Vi använder främst dessa metoder inom klinisk kemi. Förutom dessa två metoder finns det en annan metod; fast tidsmetod.
Vad är kinetisk reaktion?
Kinetisk reaktionsmetod är en analysmetod som används inom klinisk kemi för att bestämma skillnaden i absorbans mellan två punkter i en reaktions fortskridande. Här använder vi en specificerad tidsperiod för denna bestämning. Vi bör anta denna beslutsamhet; en konstant mängd produkt bildas under det tidsintervall som övervakas. Vanligtvis tar vi hänsyn till en kort tidsperiod (20 sekunder till 1 minut). Det är för att undvika att någon effekt kommer från enzymnedbrytning under reaktionens fortskridande.
Innan reaktionen påbörjas bör vi utföra en förinkubation för att undvika störningar från andra ämnen än analyten. Under förinkubationen reagerar dessa substanser fullständigt med reagenssystemet. Det finns två huvudtyper som;
- Ökande typ: reaktionen fortskrider positivt. Här är den initiala absorbansen alltid ett lägre värde än den slutliga absorbansen.
- Minskande typ: reaktionen fortsätter i negativ. Den initiala absorbansen är ett högre värde än den slutliga absorbansen.
Vad är slutpunktsreaktion?
Slutpunktsreaktionsmetod är en analysmetod som är användbar inom klinisk kemi för att bestämma den totala mängden analyter som konsumeras under en reaktions fortskridande. i denna metod betraktar vi reaktionens slutpunkt snarare än två specifika punkter som i kinetisk metod. Vanligtvis kommer slutpunkten inom 5 till 15 minuter vid 37 ◦C.
Figur 01: Vi kan använda spektrofotometrar för att mäta absorptionen
Reaktionen kan ge antingen en färgad produkt eller en färglös produkt i slutet. Däremot kan vi mäta absorbansen för denna produkt med en spektrofotometer. Absorbansen hos provet ökar med tiden. Den når ett stabilt värde som inte kommer att förändras ytterligare med tiden. Detta är slutpunkten för reaktionen.
Vad är skillnaden mellan kinetisk och slutpunktsreaktion?
Kinetisk reaktionsmetod är en analysmetod som används inom klinisk kemi för att bestämma skillnaden i absorbans mellan två punkter i en reaktions fortskridande. Här mäter vi skillnaden i absorbans mellan två punkter under reaktionens fortskridande. Dessutom är tiden det tar för denna reaktion cirka 20 sekunder till 1 minut. Medan slutpunktsreaktionsmetoden är en analysmetod som används inom klinisk kemi för att bestämma den totala mängden analyter som förbrukas under en reaktions fortskridande. I denna metod mäter vi den totala mängden analyter som deltar i reaktionen. Dessutom är tidsperioden det tar för denna reaktion 5 till 15 minuter.
Sammanfattning – Kinetisk vs slutpunktsreaktion
Det finns tre huvudsakliga reaktionsmetoder som vi använder inom klinisk kemi för analys av enzymatiska reaktioner; kinetisk metod, fixtidsmetod och slutpunktsmetod. Skillnaden mellan kinetisk reaktion och slutpunktsreaktion är att i kinetisk reaktionsmetod mäter vi skillnaden i absorbans mellan två punkter under reaktionens fortskridande, medan vi i slutpunktsreaktionsmetoden mäter den totala mängden analyter som deltar i reaktionen.
