Nyckelskillnaden mellan HEK293 och HEK293t är att HEK293 är en odödlig cellinje som härrör från den embryonala mänskliga njuren som är transfekterad med klippt humant adenovirus typ 5DNA medan HEK293t är en dottercellinje som härrör från HEK293 ursprungliga cellinje som är transfekterad med en plasmidvektor som bär SV40-replikationsstartpunkten.
Transfektion definieras vanligtvis som processen att introducera främmande DNA och RNA i celler för att påverka deras genotyp och fenotyp. Sådana introduktioner av främmande nukleinsyror genom olika biologiska, kemiska och fysikaliska metoder kan förändra cellens egenskaper. I slutändan tillåter detta studiet av genfunktion och proteinuttryck i cellens sammanhang. HEK293 och HEK293t är två cellinjer som har använts flitigt i cellbiologisk forskning under många år på grund av deras benägenhet för transfektion.
Vad är HEK293?
HEK293 är en odödlig cellinje som härrör från den embryonala mänskliga njuren som är transfekterad med klippt humant adenovirus typ 5DNA för att producera många rekombinanta proteiner. HEK293s isolerades ursprungligen från mänskliga njurceller av den holländska biologen Alex Van der Eb 1973. Dessa celler odlades i vävnadskultur från ett kvinnligt foster. Senare transfekterades de med klippt humant adenovirus typ 5DNA av Frank Graham, en postdoktor vid Van der Ebs laboratorium. Denna cellinje fick namnet HEK293 eftersom det var Franks 293rd experiment.
Figur 01: HEK293
Inkorporeringen av adenovirala gener i HEK-cellgenomet gör det möjligt för dessa celler att producera en stor mängd rekombinanta proteiner mycket effektivt. Dessutom innehåller den adenovirala vektorn CMV-promotorregionen; därför ökar den denna effektivitet ytterligare. Denna cellinje har använts som värd för genuttrycksstudier. Denna cellinje används också av bioteknikindustrin för att producera terapeutiska proteiner för genterapi.
Vad är HEK293t?
HEK293t är en dottercellinje härledd från den ursprungliga HEK293-cellinjen som är transfekterad med en plasmidvektor som bär SV40-replikationsstart för att producera en stor mängd rekombinanta proteiner. HEK293t är en human cellinje som uttrycker en mutantversion av SV40 stora T-antigenet. HEK293t skapades i Michele Carlos laboratorium i Stanford genom stabil transfektion av HEK29E-cellinjen med en plasmid som kodar för en temperaturkänslig mutant av SV40 stora T-antigenet. Den kallades ursprungligen 293/tsA1609neo. Detta beror på att transfektionen som användes för att skapa en cellinje som ger neomycinresistens och uttryck av tsA 1609-allelen av SV40 large T-antigen.
Figur 02: HEK293t
På grund av uttrycket av en mutant version av SV40 stort T-antigen, kan de transfekterade plasmiderna med SV 40-replikationsursprung kraftigt öka mängden rekombinant protein. Denna cellinje används ofta i den biotekniska industrin för proteinuttryck och produktion av rekombinanta retrovirus.
Vilka är likheterna mellan HEK293 och HEK293t?
- HEK293 och HEK293t är två cellinjer som har använts flitigt i cellbiologiska forskningen på grund av deras benägenhet för transfektion.
- Båda cellinjerna är laboratoriehärledda.
- Dessa cellinjer kan avsevärt öka mängden rekombinant proteinproduktion.
- De tillverkas genom att transfektera embryonala mänskliga njurceller med en plasmidvektor.
Vad är skillnaden mellan HEK293 och HEK293t?
HEK293 är en odödlig cellinje som härrör från den embryonala mänskliga njuren som är transfekterad med klippt humant adenovirus typ 5DNA. Däremot är HEK293t en dottercellinje härledd från den ursprungliga HEK293-cellinjen som är transfekterad med en plasmidvektor som bär SV40-replikationsursprunget. Så detta är den viktigaste skillnaden mellan HEK293 och HEK293t. Dessutom uttrycker inte HEK293 den muterade versionen av SV40 stora T-antigenet. Å andra sidan uttrycker HEK293t den muterade versionen av SV40 large T-antigenet.
Följande infografik listar skillnaderna mellan HEK293 och HEK293t i tabellform för jämförelse sida vid sida.
Sammanfattning – HEK293 vs HEK293t
HEK293 och HEK293t är två cellinjer som har använts flitigt i cellbiologisk forskning på grund av deras stadiga tillväxt och benägenhet för transfektion. HEK293 är en immortaliserad cellinje som härrör från en embryonal mänsklig njure som är transfekterad med klippt humant adenovirus typ 5DNA, medan HEK293t är en dottercellinje som härrör från HEK293 ursprungliga cellinje som är transfekterad med en plasmidvektor som bär SV40-replikationsursprung. Detta sammanfattar alltså skillnaden mellan HEK293 och HEK293t.
